Experimentelle Mikrobiologie und Genetik - ISB - Bayern

18 Arbeitstechniken
Es gibt einige Missgeschicke, die beim Erlernen mikrobiologischer Arbeitstechniken immer
wieder auftreten und die Ergebnisse von bis dahin mühevollen und oft zeitaufwändigen Arbeitsgängen
zunichte machen. Entsprechend sollte durch die Lehrkraft im Vorfeld auf Folgendes
hingewiesen werden:
• Petrischalen werden auf dem Boden beschriftet, da die Deckel leicht vertauscht werden
können und die Ansätze dann falsch beschriftet sind.
• Agarplatten sollten mit dem Deckel nach unten bebrütet werden, um die Entstehung von
Kondenswasser zu verhindern.
• Lebende Kulturen nicht mit heißen Geräten (frisch ausgeglühte Impföse!) berühren, da die
Organismen sonst abgetötet werden. Die Geräte vorher abkühlen lassen. Die Impföse
kann z. B. zuerst auf einer Stelle des Agars aufgesetzt werden, an der keine Kolonie
wächst.
2.3 Grundsätze des aseptischen Arbeitens 2
Mikroorganismen sind in der Umwelt nahezu allgegenwärtig. Zum Schutz von Kulturen, sterilen
Lösungen und sterilen Geräten vor Infektionen mit unerwünschten Fremdkeimen muss
man einige Regeln beachten.
Grundregeln
• Fenster und Türen geschlossen halten (Belüftungsanlagen evt. abschalten).
• Rasche Bewegungen vermeiden, um keine Keime aufzuwirbeln.
• Arbeitsplatz und Umgebung (Tischflächen, Ablageböden, Bodenflächen) häufig mit Desinfektionslösung
abwischen.
• Sprechen, Husten und Niesen vermeiden, da dabei winzige Tröpfchen mit Mikroorganismen
übertragen werden können.
• Ränder von Glasgefäßen, auch wenn sie mit einer übergreifenden Kappe geschützt waren,
vor und nach der Entnahme von Material in der gerade entleuchteten
Bunsenbrennerflamme abflammen. Besonders ist das erforderlich, wenn Watte oder Zellstoffstopfen
als Verschlüsse verwendet werden, weil dann der Gefäßrand ungeschützt der
Außenwelt ausgesetzt ist. Außerdem können kleine Teilchen dieser Verschlüsse am Gefäßrand
haften und während der Handhabung in das Innere gelangen. Durch das Abflammen
werden diese Teilchen beseitigt. Zudem werden lose an der Außenseite der Gefäßöffnung
anhaftende Keime abgetötet, wodurch verhindert wird, dass lebende Mikroorganismen
in das Gefäß gelangen.
• Gefäße nur so lange öffnen, wie es unbedingt erforderlich ist, und dabei möglichst schräg
halten.
• Sterile Stopfen nur am oberen, aus dem Gerät ragenden Teil anfassen, während des Arbeitens
zwischen dem kleinen Finger und Handballen halten, wobei darauf zu achten ist,
dass man nirgends mit dem sterilen Teil des Stopfens anstößt. Niemals sterile Stopfen,
die noch weiter verwendet werden sollen, auf die Arbeitsfläche ablegen, auch wenn man
diese desinfiziert hat. Sinngemäß gilt das gleiche auch für andere sterile Geräte, wie z. B.
Pipetten und Drigalski-Spatel.
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veränd. nach Näveke, R. u. Trepper, K.-P. (1979): Einführung in die mikrobiologischen Arbeitsmethoden,
Stuttgart – New York, S. 4-5 / S. 9