Amnisure®-Prom-Schnelltest (zum Nachweis eines Blasensprungs)

AmniSure®-PROM-Schnelltest (zum Nachweis eines Blasensprungs)
BEDIENUNGSANLEITUNG FÜR DEN DIAGNOSTISCHEN IN-VITRO-TEST
VERWENDUNGSZWECK
Beim AmniSure®-PROM-Schnelltest (Premature Rupture of
Membranes; Blasensprung) handelt es sich um einen qualitativen
immunochromatographischen Test, der keine weiteren Hilfsmittel
für den In-vitro-Nachweis von Fruchtwasser im Vaginalsekret
schwangerer Frauen erfordert. Der Test ist bestimmt für die
Anwendung durch medizinisches Fachpersonal bei der
Untersuchung schwangerer Frauen mit Verdacht auf vorzeitigen
Blasensprung. 1
ÜBERSICHT UND ERLÄUTERUNG DES TESTS
Bei etwa 10 % aller Schwangerschaften kommt es zu einem
vorzeitigen Blasensprung (PROM; premature rupture of the fetal
membranes). Bis zum heutigen Tag stellt ein vorzeitiger
Blasensprung eines der grössten therapeutischen Dilemmas in der
heutigen geburtsmedizinischen Praxis dar. 1 Ein vorzeitiger
Blasensprung ist vermutlich die am häufigsten vorkommende
Diagnose, die im Zusammenhang mit Frühgeburten und
Komplikationen bei Neugeborenen steht und eine Einweisung in
die Neugeborenen-Intensivstation erforderlich macht. Die
Behandlung einer Patientin mit vorzeitigem Blasensprung (PROM)
bzw. mit vorzeitigem Blasensprung bei nicht voll ausgetragenem
Kind (PPROM) ist teuer und bleibt weiterhin ein grosses
perinatales Dilemma, da der betreuende Arzt gezwungen ist, das
Risiko einer möglichst hinausgezogenen Schwangerschaft gegen
das Risiko einer Infektion abzuwägen. 1
Die Risiken eines vorzeitigen Blasensprungs sind mit schweren
Folgen beim Neugeborenen verbunden, unter anderem Frühgeburt, 2
Respiratory Distress des Neugeborenen, Nabelschnurvorfall,
Plazenta-Ablösung und Infektionen. 3 Ein vorzeitiger Blasensprung
bei nicht voll ausgetragenem Kind bezeichnet einen vorzeitigen
Blasensprung, der noch vor der 37. Schwangerschaftswoche
auftritt. Er macht 20 bis 40 % der vorzeitigen Blasensprünge aus.
Bei Mehrlingsschwangerschaften ist die Inzidenz sogar doppelt so
hoch. Ein vorzeitiger Blasensprung bei nicht voll ausgetragenem
Kind steht in Zusammenhang mit 20 bis 50 % aller Frühgeburten,
mit Infektionserkrankungen bei Mutter und Fetus,
Lungenhypoplasie beim Fetus, Nabelschnurvorfall, Entwicklung
Probe des Vaginalsekrets wird mit einem Abstrichtupfer entnommen
Der AmniSure®-PROM-Schnelltest basiert auf einem
immunochromatographischen Verfahren zum Nachweis des
Humanproteins PAMG-1 (plazentares Alpha-1-Mikroglobulin), das
in der Amnionflüssigkeit schwangerer Frauen vorhanden ist.
Plazentares Mikroglobulin wurde dank seiner einzigartigen
Merkmale als Marker ausgewählt, d.h. aufgrund seiner hohen
Konzentration in der Amnionflüssigkeit, seiner geringen
Konzentration im Blut und der extrem niedrigen
Hintergrundkonzentration (50–220 Picogramm/ml) im
zervikovaginalen Sekret bei intakter Fruchtblase.
Der Test verwendet hochsensitive, monoklonale Antikörper, die
bereits geringste Mengen des nach einem Blasensprung im
zervikovaginalen Sekret vorhandenen Proteins nachweisen können.
Zur Minimierung der Häufigkeit von falschen Ergebnissen wurden
noch zwei weitere monoklonale Antikörper ausgesucht, um die
Nachweisgrenze von AmniSure® auf eine optimal niedrige
Konzentration einzustellen. Diese Konzentration ermöglicht den
Nachweis extrem kleiner Mengen an Amnionflüssigkeit im
Vaginalsekret (den 0,05. bis 0,005. Teil eines Tropfens). Die
Hintergrundkonzentration des PAMG-1, das diese Kombination
aus monoklonalen Antikörpern verwendet, beträgt etwa 50–220
Picogramm (d.h. 0,05–0,22 ng) auf 1 ml Vaginalsekret. Die
Nachweisgrenze unseres Tests liegt bei 5–7 ng/ml, das heisst
mindestens 20-mal höher als die Hintergrundkonzentration. Diese
Lücke ermöglichte eine zunehmende Genauigkeit unseres Tests auf
über 99 %, da sie wirksam falschpositive und falschnegative
Ergebnisse ausschaltet.
Während des Testablaufs bindet plazentares Mikroglobulin aus der
Probe sequenziell an einen monoklonalen Antikörper A (A-Mak),
an den Markierungspartikel gekoppelt sind, und anschliessend an
einen weiteren monoklonalen Antikörper B (B-Mak), der auf einem
unlöslichen Träger immobilisiert ist. Sobald A-Maks im
Padbereich mit dem PAMG-1 in Berührung kommen, „fangen” sie
PAMG-1 ein und nehmen es mit in den Testbereich. Der
Testbereich des Teststreifens verfügt über immobilisierte B-Maks.
B-Maks „treffen” mit dem an die A-Maks gebundenen PAMG-1
zusammen, die aus dem Padbereich nach oben wandern. Dieses
„Zusammentreffen” immobilisiert das System PAMG-1/A-Maks
und dabei entsteht eine braun-gelbe, im Testbereich sichtbar
werdende Testbande. Diese Bande entsteht durch Goldpartikel, die
an den A-Antikörpern haften, und deutet auf einen Blasensprung
hin. Die zweite Bande (Kontrollbande) soll anzeigen, ob der Test
ordnungsgemäss funktioniert. Diese Bande entsteht, wenn
fetaler Fehlbildungen, postnataler Endometritis. Alle diese
Komplikationen führen zu einer signifikanten Erhöhung der fetalen
und mütterlichen Morbidität und Mortalität. 4 Der Latenzzeitraum
bei vorzeitigem Blasensprung bei nicht voll ausgetragenem Kind
steht in einem umgekehrt proportionalen Verhältnis zur
Schwangerschaftsdauer. Das heisst, das Risiko für Komplikationen
ist vor allem bei Frühgeburten mit sehr unreifen Säuglingen und
ihren Müttern sehr hoch. Da ein vorzeitiger Blasensprung bei nicht
voll ausgetragenem Kind mit 20 bis 50 % aller Frühgeburten in
Zusammenhang steht, ist dieser Faktor ebenfalls für neonatale
Probleme verantwortlich, die durch die Unreife des Fetus bedingt
sind. 5
Die Nichterkennung von vorzeitigem Blasensprung kann dazu
führen, dass keine rettenden Geburtshilfemassnahmen durchgeführt
werden (beispielsweise kommt es zur Neugeborenensepsis, wenn
der vorzeitige Blasensprung erst 32 Stunden nach seinem
tatsächlichen Eintritt diagnostiziert wird). Im umgekehrten Fall
kann ein falsch diagnostizierter Blasensprung zu unangemessenen
Eingriffen führen (z.B. zu einer Krankenhauseinweisung oder
Geburtseinleitung). Daher ist die richtige und rechtzeitige
Diagnose dieser Komplikation von entscheidender Wichtigkeit
für den Klinikarzt. 6 Eine genaue Diagnose des Blasensprungs
bleibt jedoch ein häufiges klinisches Problem in der
Geburtsmedizin. 7 Die rechtzeitige Diagnose dieser Störung ist von
entscheidender Bedeutung, da ein vorzeitiger Blasensprung mit
schweren Komplikationen für das Neugeborene und die Mutter
verbunden ist. Unglücklicherweise gibt es derzeit in der klinischen
Praxis noch keinen „Goldstandard" für die Diagnose eines
Blasensprungs. Die derzeit üblicherweise erhältlichen Tests sind
ungenau und in gewisser Weise invasiv. Die derzeit häufigsten
Tests – Nitrazin- und Ferning-Test – sind höchst unzuverlässig und
werden nach mehr als einer Stunde seit dem Blasensprung
zunehmend ungenauer, und nach mehr als 24 Stunden sogar völlig
unbrauchbar. Hieraus lässt sich schliessen, dass diese Tests im
Falle eines protrahierten, vorzeitigen Blasensprungs keine besseren
diagnostischen Informationen zur Verfügung stellen als die durch
einfache klinische Einschätzung gewonnenen. 8
AmniSure® löst diese Probleme. Es handelt sich hierbei um einen
Schnellteststreifen, der einen Blasensprung nachweisen kann und
dabei eine sehr genaue und rechtzeitige Diagnose des vorzeitigen
Blasensprungs ermöglicht. Folglich können rechtzeitige
Massnahmen ergriffen werden, um Komplikationen zu vermeiden
(prophylaktischer Einsatz von Antibiotika, wehendämpfende
Medikamente oder Kortikosteroide, Geburtseinleitung usw).
VORTEILE DES TESTS
Das AmniSure®-Testkit ist ein in sich abgeschlossenes Testsystem,
das qualitative Ergebnisse zur Verfügung stellt, welche die
Rechtzeitigkeit, Genauigkeit, Sensitivität, Spezifität und
Zuverlässigkeit derzeit erhältlicher Methoden übertreffen. Bei
AmniSure® handelt es sich um einen Test, der das gesamte
Spektrum des diagnostischen Bedarfs abdeckt – von einfachen
Fällen, bei denen eine bestätigende Diagnose erforderlich ist, bis
hin zu den schwierigsten Fällen, bei denen keine sichtbaren
Anzeichen auf das Vorhandensein von Amnionflüssigkeit
hindeuten (so genannter subklinischer Blasensprung). Der Test
erfordert keine Untersuchung mit dem Spekulum, das heutzutage
routinemässig zur Diagnose des Blasensprungs eingesetzt wird.
TESTPRINZIP
Eine Probe der Amnionflüssigkeit (die mit Hilfe eines
Abstrichtupfers aus der Vagina entnommen wurde) wird in ein
Fläschchen mit Pufferlösung gegeben. Die Lösung extrahiert das
Probenmaterial eine Minute lang aus dem Abstrichtupfer. Danach
wird der Tupfer entsorgt. Der AmniSure®-Teststreifen
(Tauchstreifen – mit Querlaufrichtung) wird dann in das
Fläschchen getaucht. Die Probensubstanz wandert dann vom
Padbereich des Tauchstreifens hinauf in den Testbereich. Das
Testergebnis wird im Laufe der folgenden 5–10 Minuten anhand
eines oder zweier Streifen visuell abgelesen.
Kontrollbande
AmniSure®-Testkit Testbande
Abstrichtupfer mit Probe wird in das Fläschchen mit Pufferlösung getaucht Padbereich
Kaninchen-anti-Maus-IgG-Antikörper die Maus-A-Antikörper mit
den Goldpartikeln einfangen. Die Goldpartikel verleihen der
entstehenden Kontrollbande ihre Farbe.
REAGENZIEN UND MATERIALIEN
Mitgelieferte Materialien: 1. Bedienungsanleitung 2. AmniSure®-
Teststreifen („Tauchstreifen” – mit Querlaufrichtung) in einem
Folienbeutel mit Trockenmittel. Jeder Teststreifen enthält:
a) Monoklonale Antikörper A (aus einem Maus-Hybridom)
b) Immobilisierte, monoklonale Antikörper B (aus einem anderen
Maus-Hybridom) c) Kolloidale Goldpartikel, die an einen
monoklonalen Antikörper A gebunden sind d) Maus-markiertes
IgG e) Kaninchen-anti-Maus-IgG-Antikörper 3. Steriler
Polyestertupfer zur Probenentnahme aus der Vagina 4.
Kunststofffläschchen mit wässrigem Lösemittel. Die
Lösemittellösung enthält: a) 0,9 % NaCl b) 0,1 % Triton X100 c)
0,01 % NaN3
VORSICHTSMASSNAHMEN UND WARNHINWEISE
*Das AmniSure®-Testkit ist ausschliesslich für den diagnostischen
In-vitro-Gebrauch vorgesehen. Keiner der Testkit-Bestandteile darf
eingenommen werden. *Die vorliegende Bedienungsanleitung
aufmerksam lesen und genau einhalten. Die Nichteinhaltung der
Anweisungen kann zu ungenauen Ergebnissen führen. *Die
Sicherheitsvorkehrungen für die Entnahme, Handhabung und
Entsorgung des Probenmaterials sind unbedingt einzuhalten.
*Keine beschädigten Testkit-Bestandteile verwenden. *Gebrauchte
Testkits gelten als biologischer Sondermüll. *Bei der Arbeit mit
Testkits bzw. der Entsorgung von gebrauchten Testkits die
entsprechenden Sicherheitsvorkehrungen beachten. *Keine Testkits
verwenden, deren Haltbarkeitsdatum überschritten ist; das
Haltbarkeitsdatum ist auf dem Folienbeutel und auf dem
Verpackungsetikett aufgedruckt. *Die Bestandteile des Testkits
nicht wiederverwenden. *Den Teststreifen (Tauchstreifen) bzw.
den Beutel aus Aluminiumfolie mit dem darin befindlichen
Teststreifen nicht knicken.
LAGERUNG UND HALTBARKEIT
*Das Testkit an einem trockenen Ort bei 4 bis 24 °C lagern.
NICHT EINFRIEREN. *Wird der Folienbeutel bei den
empfohlenen Temperaturen aufbewahrt, ist er bis zu seinem auf der
Verpackung angegebenen „Haltbarkeitsdatum” haltbar.
*AmniSure® nach der Entnahme aus dem Folienbeutel innerhalb
von sechs (6) Stunden verwenden.
Der Teststreifen wird in das Fläschchen getaucht
TESTDURCHFÜHRUNG
1. Das Lösemittelfläschchen an seinem Deckel fassen und
gründlich schütteln, um sicherzustellen, dass die gesamte
Flüssigkeit auf den Boden des Fläschchens gelangt. Das
Fläschchen öffnen und beiseite stellen.
2. Zur Entnahme einer Probe von der Oberfläche der Vagina
den mitgelieferten, sterilen Polyestertupfer verwenden.
Den sterilen Tupfer aus seiner Verpackung
herausnehmen und dabei die Hinweise auf der
Verpackung beachten. Das Ende des Polyestertupfers
darf vor seiner Einführung in die Vagina keine anderen
Gegenstände berühren. Die Patientin muss dabei flach
auf dem Rücken liegen. Den Polyestertupfer in der Mitte
des Stabes halten und vorsichtig so weit in die Vagina
einführen, bis die Finger die Haut berühren (höchstens 5–
7 cm). Den Tupfer nach 1 Minute wieder aus der
Scheide herausziehen.
3. Das Tupferende in das Fläschchen stecken und den
Tupfer eine Minute lang durch kreisende Bewegungen in
der Lösung ausspülen.
4. Den Tupfer herausziehen und entsorgen.
5. Den Folienbeutel an den Einreissmarkierungen öffnen
und den AmniSure®-Teststreifen entnehmen.
6. Das weisse (mit Pfeilen markierte) Ende des Teststreifens
in das Fläschchen stecken und in die Lösung tauchen.
Mindestens 5 und höchstens 10 Minuten darin stehen
lassen. Bei starkem Abgang von Amnionflüssigkeit ist
das Testergebnis schnell zu erkennen (schon nach 5
Minuten), während der Nachweis eines geringen
Abgangs erst nach 10 Minuten sichtbar wird.
7. Sobald im Fläschchen zwei Banden deutlich zu erkennen
sind (frühestens nach 5 Minuten) oder nach genau 10
Minuten den Teststreifen herausnehmen. Den
Teststreifen auf eine saubere, trockene und flache
Unterlage legen und das Ergebnis ablesen. 15 Minuten
nach dem Eintauchen des Teststreifens in das Fläschchen
dürfen die Ergebnisse nicht mehr abgelesen und
ausgewertet werden.
2. 3. 6.

AUSWERTUNG VON ERGEBNISSEN
Eine Bande: KEIN BLASENSPRUNG: Zwei Banden: BLASENSPRUNG: Keine Banden: TEST IST UNGÜLTIG, Test wiederholen:
** Die Farbintensität der Testbanden kann unterschiedlich sein. Der Test ist auch dann gültig, wenn die Testbanden schwach oder ungleichmässig ausgeprägt sind. Das Testergebnis
nicht anhand der Farbintensität der Testbanden auswerten.
QUALITÄTSKONTROLLE
Jedes AmniSure®-Testkit verfügt über ein eingebautes Reagenz
und interne Verfahrenskontrollen, um eine ordnungsgemässe
Funktion und Zuverlässigkeit zu gewährleisten. Das
Sichtbarwerden von einer bzw. zwei Banden im Ergebnisbereich
bestätigt den einwandfreien Testablauf. Ist nur die Kontrollbande
sichtbar, ist das Testergebnis negativ. Ist sowohl eine
Kontrollbande als auch eine Testbande sichtbar, ist das
Testergebnis positiv. Sind keine Banden sichtbar, ist das
Testergebnis ungültig.
EINSCHRÄNKUNGEN DES TESTS
• Der AmniSure®-PROM-Test dient dem In-vitro-Nachweis des
Humanproteins PAMG-1 in der Amnionflüssigkeit, die im
Vaginalsekret schwangerer Frauen vorhanden ist. Der Test sollte
zur Untersuchung von Patientinnen mit Verdacht auf Blasensprung
und/oder mit klinischen Anzeichen/Symptomen, die auf einen
Blasensprung hindeuten, eingesetzt werden.
• Alle Anweisungen sind genauestens zu befolgen, um genaue
Ergebnisse zu erhalten.
• Bei jedem Testkit handelt es sich um einen Einmalartikel, der
nicht wiederverwendet werden kann.
• Die Ergebnisse des AmniSure-PROM-Tests sind rein qualitativ.
Eine quantitative Einschätzung ist aufgrund der Testergebnisse
nicht möglich.
• Wenn ein nennenswerter blutiger Ausfluss in der Scheide
vorhanden ist (Polyester-Tupfer ist rötlich verfärbt), kann es
passieren, dass der Test nicht zuverlässig funktioniert. In solchen
Fällen wird von seiner Anwendung abgeraten. In Fällen mit nur
geringen Spuren von Blut (Polyester-Tupfer ist nur leicht rosa)
funktioniert der Test immer noch einwandfrei.
• In sehr seltenen Fällen, wenn seit dem Blasensprung 12 oder
mehr Stunden vergangen sind, kann es unter Umständen zu einem
falschnegativen Ergebnis kommen.
• AmniSure® darf frühestens 6 Stunden nach der Anwendung
desinfizierender Lösungen oder anderer Behandlungsmittel in der
Vagina verwendet werden.
ERWARTETE WERTE
Der Abgang von Amnionflüssigkeit ist bei allen Frauen ein
Hinweis auf Blasensprung. Studien zum plazentaren Protein Alpha-
1-Mikroglobulin (PAMG-1) haben nachgewiesen, dass es sich
hierbei um einen Marker für Amnionflüssigkeit handelt. 9,10 Die
Konzentration von PAMG-1 im Zervikal- und Vaginalsekret wurde
bei schwangeren Frauen ohne Schwangerschafts-komplikationen
gemessen und liegt im Bereich zwischen 0,05 und 0,22 ng/ml. Bei
Vorliegen einer Vaginitis oder einer unerheblichen Beimischung
von Blutserum kann die PAMG-1-Hintergrundkonzentration auch
Maximalwerte von 3 ng/ml erreichen. PAMG-1-Konzentrationen in
der Amnionflüssigkeit liegen im Bereich von 2,000 bis
25,000 ng/ml. Ein klinisch relevanter Abgang von
Amnionflüssigkeit erhöht die PAMG-1-Konzentration im
zervikovaginalen Sekret um einen Faktor von Tausend. Die
Nachweisgrenze des AmniSure®-Tests ist so eingestellt, dass sie
der 20-fachen PAMG-1-Hintergrundkonzentration entspricht
(AmniSure® kann bereits 5 ng/ml PAMG-1 nachweisen). Damit ist
die Abhängigkeit der Testergebnisse von eventuellen
Schwankungen der erwarteten Werte (PAMG-1-Konzentrationen)
in einer bestimmten Population aufgehoben.
LEISTUNGSMERKMALE
Die klinische Leistung des AmniSure®-Tests wurde in zwei
unabhängigen klinischen Studien ermittelt. Eine der Studien
umfasste nur einen klinischen Standort in Moskau, Russland. Eine
weitere Studie umfasste zwei Standorte in Kalifornien, USA.
Ergebnisse der klinischen Studien:
Sensitivität: 99 %. Spezifität: 100 %. PPV (Positiver
Vorhersagewert): 100 %. NPV (Negativer Vorhersagewert): 99 %.
Parallel zum Nitrazin- und dem Ferning-Test wurden die in die
Studie aufgenommenen Frauen auch mit AmniSure® getestet.
Insbesondere, wenn es zu einer deutlichen Diskrepanz zwischen
den Ergebnissen des AmniSure®-Tests gegenüber den Ergebnissen
der anderen Tests kam, wurde den Patientinnen eine besonders
sorgfältige klinische Beobachtung zuteil. In allen Fällen mit einer
Diskrepanz zwischen den mit AmniSure® und den mit anderen
Tests ermittelten Ergebnissen konnte anhand einer anschliessenden
Beobachtung der Patientin AmniSure® als der Test nachgewiesen
werden, der die richtige Diagnose gestellt hatte. Die oben
beschriebene Testdurchführung ergab zwei endgültige
Testdatensätze: „korrigierte Ergebnisse” und „nicht korrigierte
Ergebnisse”. Die nicht korrigierten Ergebnisse wurden zunächst
unter der Annahme zusammengestellt, dass AmniSure® in allen
Fällen, in denen eine Diskrepanz zwischen AmniSure® und den
derzeit gängigen Tests festgestellt wurde, falsche Ergebnisse
anzeigte. In Anbetracht der Tatsache, dass eine solche Diskrepanz
Anlass zu weiteren Beobachtungen und Tests bei der Patientin gab
und dass sich AmniSure® in allen Fällen mit einer festgestellten
Diskrepanz letztendlich als der Test mit dem richtigen Ergebnis
herausgestellt hat, wurden die „korrigierten Daten”
zusammengetragen. Korrigierte Ergebnisse bedeuteten somit die
Aufhebung der Diskrepanz und spiegelten die nachweisliche
Überlegenheit von AmniSure® gegenüber anderen Tests wider.
Interferenzstudien
Vaginalinfektionen oder Urin wirken sich nicht auf die Ergebnisse
des AmniSure®-Tests aus. Detaillierte Forschungs- und
Analysearbeiten ergaben, dass die PAMG-1-Konzentration in
Vaginalflüssigkeiten bei Infektionen niemals einen Wert von
3 ng/ml überschreitet. Die Ansprechgrenze des AmniSure®-Tests
liegt bei 5 bis 7 ng/ml und schliesst damit alle durch Infektionen
bedingten Interferenzmöglichkeiten aus. Die Konzentration von
Tabelle 1. Ergebnisse der Untersuchung zur Ergebnisstabilität
PAMG-1 in Sperma liegt nachweislich immer unter 4 ng/ml. Die
im Vaginalsekret vorhandene Konzentration von PAMG-1 aus dem
Sperma ist aufgrund des vierfachen Verdünnungseffekts bei der
Testdurchführung sogar noch niedriger. Daher gab es bei der
Entwicklung des AmniSure®-Tests und in den klinischen Studien
bei den Ergebnissen keine Interferenzen durch den Sperma-Faktor.
Das Gleiche gilt auch für Urin. Fünfzehn Urinproben wurden mit
ELISA-Assays auf ihre PAMG-1-Konzentration untersucht. Die
Sensitivität der ELISA-Assays betrug 0,5 ng PAMG-1 auf 1 ml
Lösung. Parallel dazu wurde auch AmniSure® zum Nachweis von
PAMG-1 in Urin eingesetzt. Die Proben wurden bei schwangeren
Frauen in der 25. bis 40. Schwangerschaftswoche entnommen.
Beide Methoden erbrachten negative Ergebnisse: PAMG-1 wurde
nicht nachgewiesen.
Kreuzreaktivität
Die Spezifität der im AmniSure®-Test vorhandenen,
monoklonalen Antikörper wurde bei der Untersuchung ihrer
kreuzreaktiven Bindungen an Proteine getestet: Alpha-2-
Mikroglobulin des Fruchtbarkeitshormons hCG (humanes
Choriongonadotropin), trophoblastisches Beta-1-Glycoprotein,
humanes plazentares Lactogen, Alpha-Fetoprotein, humanes
Serumalbumin und einige IGFBP-Proteine. Die in AmniSure®
verwendeten, monoklonalen Antikörper „A” und „B” zeigten keine
Kreuzreaktion mit anderen Proteinen mit Ausnahme des
Antikörpers „B”, der in der Testbande verwendet wird und eine
nachweisliche Kreuzreaktion mit dem im ELISA-Assay
vorhandenen Protein IGFBP-3 zeigt. Es wurde nachgewiesen, dass
die IGFBP-3-Konzentration im Vaginalsekret schwangerer Frauen
680 ng/ml erreicht, doch diese Konzentration beeinträchtigt
keinesfalls die Sensitivität des AmniSure®-Tests für PAMG-1.
Stabilität der Ergebnisse
Die AmniSure®-Testergebnisse können 5 bis 10 Minuten nach
dem Eintauchen des Tauchstreifens in das Fläschchen abgelesen
werden. Es wurden Stabilitätstests durchgeführt, bei denen ein Los
mit Tausend AmniSure®-Testkits untersucht wurde. Dabei wurde
gereinigtes PAMG-1 in Konzentrationen von 10 bzw. 5 ng
PAMG-1 auf 1 ml physiologische Kochsalzlösung verwendet.
Die Dauer/Stabilität der Ergebnisse wurde ebenfalls gemessen.
Nach dem Sichtbarwerden (Banden entstanden im Testbereich)
blieb das Ergebnis mindestens 5 Minuten lang stabil ablesbar.
Diese Art von Stabilität wird dann beobachtet, wenn die PAMG-1-
Konzentration sehr gering ist (5–10 ng/ml). Sobald die
Konzentration höher ist, bleiben die Banden für die Dauer von
einigen Stunden stabil ablesbar. So weist AmniSure® eine
Ergebnisstabilität von nur 5 Minuten auf, wenn die Ergebnisse
volle 10 Minuten benötigen, um sichtbar zu werden.
Konzentration des gereinigten PAMG-1 auf 1 ml physiol. Kochsalzlösung (ng/ml) Zeitdauer bis zum Erscheinen des Ergebnisses im Testbereich des AmniSure®-Tests
10 ~ 2,5 Minuten
5 ~ 5,5 Minuten
LITERATUR
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Technische Beratung:
AmniSure® International LLC
30 JFK Street #4
Cambridge, MA 02138, USA
617-234-4441 Tel.
www.amnisure.com
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EC REP
MT Promedt Consult. GmbH
Altenhofstr. 80, D-66386 St.
Ingbert, Deutschland