IMMUNHÄMATOLOGISCHE UNTERSUCHUNGSMETHODEN

4.6 Direkter COOMBS- Test
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Dient zum Nachweis von inkompletten Antikörpern, die bereits in vivo an erythrozytäre Antigene
gebunden worden sind. Außerdem können Komplementfaktoren, die nach einer abgelaufenen
Antigen-Antikörperreaktion an die Erythrozytenmembran gebunden worden sind, nachgewiesen
werden. Der direkte COOMBS-Test wird zur Abklärung von hämolytischen Anämien, zur
Abklärung von Transfusionsreaktionen, zur Abklärung einer positiven Eigenprobe (siehe 4.3.1 u.
4.3.4) und als Screening-Test bei Neugeborenen eingesetzt, wenn die Mutter Rhesus negativ ist
oder die Blutgruppe 0 besitzt. oder bei der Mutter früher irreguläre Antikörper nachweisbar waren
(Mutterpaß, Anamnese).
4.6.1 Prinzip
lnkomplette Antikörper (bzw. Komplementfaktoren), die sich in vivo an Erythrozytenantigene
gebunden haben, werden durch Zugabe von COOMBS-Serum (= Antihumanglobulin) dargestellt.
Dabei reagieren die Antikörper des COOMBS-Serums mit den Antikörpern bzw.
Komplementfaktoren auf den Erythrozyten und führen zu einer Hämagglutination (siehe Abbildung
3).
4.6.2 Durchführung
Die Patientenerythrozyten werden 3mal mit physiologischer Kochsalzlösung gewaschen,
Antihumanglobulin (COOMBS-Serum) zugegeben, vorsichtig gemischt, zentrifugiert und auf
Hämolyse und Agglutination abgelesen. Der Waschprozeß dient dazu. humane Globuline des
Empfängerserums. die nicht an die Erythrozyten über eine Antigen-Antikörperreaktion gebunden
sind. zu entfernen. Ohne Waschprozeß würden diese nicht spezifisch gebundenen Globuline das
Antihumanglobulin "neutralisieren" (verbrauchen). Damil könnten die Antikörper, die spezifisch an
erythrozytäre Antigene gebunden sind, nicht über den Antihumanglobulintest nachgewiesen
werden.
Bei negativem Reaktionsausfall werden COOMBS-Kontrollzellen zum Ansatz gegeben, vorsichtig
gemischt und auf Agglutination und Hämolyse abgelesen. Dieser Untersuchungsschritt überprüft als
positive Kontrolle den Test. indem Testerythrozyten, die mit inkompletten Antikörpern beladenen
sind, zum Ansatz gegeben werden und zur Agglutination führen.