Øvelse 1

· Ligning 6: · · 0 · Ved anvendelse af regnereglerne for logaritmer kan ligningen (5) omskrives til:Ligning (7): – · Ligning (8): · Af ligning (8) ses, at hvis koncentrationen af lægemiddelstof af sættes som funktion af tiden i ensemilogaritmisk graf med logaritmisk y-akse fås en ret linie med hældningen –k e og skæring på y-aksen i lnC 0 . Det er derfor muligt eksperimentelt at bestemme værdier for k e og C 0 , hviskoncentationsmålingerne afsættes mod tiden i en semilogaritmisk graf.Figur 1. nedenunder viser den grafiske afbildning af ligningerne (6) og (8).En vigtig parameter, der beskriver en konkret egenskab ved et lægemiddelstof i en 1-kompartmentmodel er halveringstiden. Halveringstiden, t ½ , er den tid det tager for organismen at reducerekoncentrationen til det halve.Ved anvendelse af ligning (8) kan der beregnes et udtryk for t ½ , idet man indsætter t=t ½ og C =0,5C 0 i ligningen:, · ·½ 3

Mens den laveste plasmakoncentration i dosisintervallet opnås umiddelbart inden den næste dosis.Dvs. for t=:Ligning (15): · · ·6

Praktisk udførelseBlåt mærkeI øvelsen simuleres en 1-kompartment model med i.v.-indgift. Den opdeles i to dele, den ene følgerkoncentrationsforløbet efter en enkelt dosis, mens man i den anden del arbejder med gentagenindgift indtil steady-state opnås.Forsøgsopstillingen består af en peristaltisk pumpe, der via et slangesystem transporterer væskerundt mellem forskellige bægerglas.Væsken i systemet er PBS, der skal simulere blodet i den biologiske organisme. Farvestoffet, dersimulerer lægemiddelstoffet er phenolrødt. Fra bægerglasset mærket ”reservoir” føres væsken viaslangen med blåt mærke over i målekarret mærket ”kompartment”. Sørg for at ”reservoiret” altid erfyldt med PBS, så der ikke kommer luft i slangerne. I ”kompartment” skal begge slager med sortmærke placeres. Fra ”kompartment” føres væsken over i ”opsamlingskarret” via slangen med rødtmærke. Når ”opsamlingskarret” er fyldt hældes indholdet i vasken.7

2. Del – i.v. gentagen indgift1. Fyld ”reservoiret” med PBS og tilsæt 100 ml PBS i ”kompartment” karret. Kom magneten ibægerglasset og sæt det på magnetomrøren. Indstil hastigheden så der opnås passendeomrøring.2. Tænd pumpen, og hastigheden er indstillet på 10 ml/min. Lad pumpen køre i nogle fåminutter indtil der ikke er mere luft i slangerne.3. Tilsæt 400 µl phenolrødt stamopløsning 20 mg/ml til ”kompartment” karret og startstopuret. Udtag 100 µl prøve fra ”kompartment” karret efter 1, 2, 3, 4 og 5 min. og overførdem til mikrotiterpladen i lodrette kolonner. Umiddelbart efter den sidste prøve tilsættes enny dosis phenolrødt på 400 µl phenolrødt stamopløsning 20 mg/ml (HUSK omrystninginden hver udtagning), og der udtages igen 100 µl prøve fra ”kompartment” karret 1, 2, 3, 4og 5 min. efter sidste dosis (hvilket reelt svarer til 6, 7, 8, 9 og 10 min. efter forsøgets start).Denne procedure gentages, således at der hver 5. min. tilsættes en dosis på 400 µlphenolrødt stamopløsning 20 mg/ml, mens der mellem hver dosis udtages prøve hver 1,2,3,4og 5 min. efter sidste dosis. Der tilsættes en ny dosis phenolrødt hver 5. min. i en time,således at sidste dosis tilsættes nøjagtig 60 min efter forsøgets start. Efter denne dosisudtages prøver efter 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15 og 20 min.4. Inden prøverne analyseres i ELISA-readeren fyldes to brønde på mikrotiterpladen med PBSfra ”reservoir” karret (se skema). Disse fungerer som ”baggrund” ved den efterfølgendevurdering af analyseresultatet.5. Stop pumpen. Tøm ”opsamlingskarret”. Overfør herefter slangerne med sorte mærker til etrent bægerglas med destilleret vand. Skyld ”reservoir” karret og fyld det med dest. Vand ogtænd pumpen igen. Skyld systemet igennem i 5-10 min. så alt phenolrødt er ude afslangerne.9

Øvelse 1.Spørgsmål:Tegn et dobbelt arimetisk og semilogaritimisk plot af koncentrations-tidsforløbet forbåde enkelt og gentagen indgift.Der anvendes linear regression for alle relevante beregninger (husk at angivekorrelationskoefficienten).1. Beregn k e , t ½ , V d og Cl for phenolrødt ud fra data for enkelt indgift. Relaterværdierne til forsøgsopstillingen.2. Angiv hvornår man når steady-state ved en gentagen indgift og beskriv tiden tilsteady-state i multipla af halveringstiden for phenolrødt.Beregn hvornår man burde have nået henholdsvis 90 og 99% af steady-state niveauet(angiv resultatet i multipla af halveringstiden)11

3. Beregn C max og C min i doseringsintervallet ved steady-state.Hvad bør forskellen mellem C max og C min svare til – og er dette tilfældet?Navn:Studienr.:Holdnr.:Godkendt/ikke godkendt:Dato/initialer:12