DNA-sekvensanalyse

STORE OPGAVER1. DNA-sekvensanalyseA. Ved kortlægningen af det menneskelige genom bestemmer man blandt andetnukleotidrækkefølgen i DNA. Det sker ved en såkaldt sekvensanalyse. Princippeti sekvensanalysen er vist i figur 1.Ved denne metode anvendes nukleotidanaloger, såkaldte dideoxynukleotider. Deadskiller sig fra de normale deoxynukleotider som vist i figur 2. Når et dideoxynukleotidindbygges under DNA-kopiering, stopper kopieringen.3' CGACTCGATTC 5'5' GCTGAGCTAAG 3'DNA der skal analyseres3' CGACTCGATTC 5'DNA denatureres og kunden ene streng anvendes3' CGACTCGATTC 5'5' GCTG 3'+DNA polymerase + alle defire normale nukleotiderRadioaktiv primerpåsættes+ ddG + ddA + ddT + ddCTil hvertreagensglastilsættes etaf de firedideoxynukleotiderGCTGAGGCTGAGCTAAGGCTGA GCTGAGCTGCTGAGCTAGCTGAGCTAAGCTGAGC76G A T C–DNAfragmenterneadskilles vedelektroforese54321+Figur 1. Princippet i en DNA-sekvensanalyse.2

O -O - 55O P O CH 2O GuaninO P O CH 2O Guanin41O - 41HH3 23 2OH HH HFigur 2.Normalt DNA-nukleotid(deoxynukleotid)O -Dideoxynukleotid(ddG)a. Gør rede for forskellen mellem normale DNA-nukleotider og dideoxynukleotider,se figur 2.b. Forklar, hvorfor den i figur 2 viste nukleotidanalog stopper DNA-kopieringen.c. Gør rede for princippet i metoden vist i figur 1, og aflæs resultatet af elektroforesen.Opgaven fortsætter3