22.11.2014 Views

Laboratoriekursus 2011

Laboratoriekursus 2011

Laboratoriekursus 2011

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

<strong>Laboratoriekursus</strong><br />

<strong>2011</strong><br />

Øvelsesvejledninger<br />

Biologi B<br />

VUC Århus, HF-afdelingen Bülowsgade 68, 8000 Århus C<br />

På kursusdagene kan du få fat på os på telefon 87322583


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Indholdfortegnelse:<br />

Velkomstbrev side 3<br />

Vejledning i rapport og journalskrivning side 4-5<br />

Øvelsesvejledninger:<br />

Øvelse nr. 1: Bestemmelse af primærproduktionen side 6-9<br />

Øvelse nr. 2: Forsøg med osmose i kartofler side 10-14<br />

Øvelse nr. 3: Metode til påvisning af stivelse og maltose side 15-18<br />

Øvelse nr. 4: Forsøg med enzymet spytamylase side 19-23<br />

Øvelse nr. 5: Bestemmelse af kondital side 24-28<br />

Øvelse nr. 6: Måling af blodglukose ved indtagelse af kulhydrater side 29-33<br />

Øvelse nr. 7: Bestemmelse af egen blodtype side 34-38<br />

Øvelse nr. 8: ELISA-test påvisning af "kyssesyge" side 39-44<br />

Øvelse nr. 9: Mitosen - den almindelige celledeling side 45-50<br />

2


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Kære selvstuderende i biologi.<br />

Vi ønsker dig velkommen på laboratoriekursus på VUC Århus.<br />

Kurset afholdes i biologilokale SJ 10,<br />

som er beliggende i VUC's bygning Sct. Joseph<br />

Bülowsgade 68, 8000 Århus C<br />

Om kurset:<br />

Laboratoriekurset omfatter den eksperimentelle del i faget biologi B og er en forudsætning for at<br />

blive indstillet til prøve i faget. For at få udstedt et kursusbevis kræver det, at du har udført alle<br />

forsøgene på kurset, at dine rapporter lever op til de krav der stilles i rapporten og at rapporterne<br />

afleveres rettidigt - afleveringsfristerne meddeles på kurset. Til eksamen, på din egen skole, skal<br />

du huske at medbringe de rettede rapporter, dine journaler og dit kursusbevis.<br />

Kursusmaterialet indeholder:<br />

En vejledning i rapportskrivning<br />

En Vejledning til hver øvelse<br />

Først i hver øvelsesvejledning finder du et punkt kaldet "relevant baggrundsstof" her henvises<br />

der til den teori, det kan være relevant at sætte sig ind i, inden du skal lave øvelsen. Bagest i hver<br />

vejledning finder du en "rapportvejledning", der giver dig en disposition til hvad din rapport bør<br />

indeholde.<br />

Forberedelse til kurset:<br />

Det forventes at du inden kurset har printet kursusmaterialet ud og medbringer dette på kurset.<br />

Og at du til de enkelte kursusdage forbereder dig til forsøgene dvs. som et minimum læser dine<br />

øvelsesvejledninger og sætter dig grundigt ind i hvordan forsøgene skal udføres. Husk også at<br />

laboratoriekurset er et godt tilbud til at få diskuteret faglige spørgsmål undervejs.<br />

På kurset skal du medbringe:<br />

Dit kursusmateriale, lærebog, lommeregner, blyant og papir. Da kurset afholdes en weekend er<br />

der desværre ikke mulighed for at købe mad på stedet. Det er derfor en god ide at medbringe en<br />

madpakke eller du kan købe mad i nærheden. Der er både en kiosk og et pizzaria. Kaffe og te laver<br />

vi selv og skolen har også en mikrobølgeovn.<br />

Hvis porten til skolen er låst når du ankommer eller hvis du er blevet forsinket kan du kontakte<br />

kursets lærere på tlf. 87 32 25 83 i kursustiden.<br />

Med venlig hilsen<br />

Biologilærerne på VUC Århus<br />

3


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Vejledning i rapportskrivning.<br />

I forbindelse med det eksperimentelle arbejde udarbejdes der rapporter over de udførte forsøg.<br />

Rapporten er en skriftlig formidling af et eksperimentelt arbejde til en modtager. Rapporten skal<br />

derfor være formuleret præcist, og den skal være saglig og objektiv. Læseren er dig selv og<br />

læreren. Rapporten skal skrives så begge parter hurtigt forstår indholdet - også lang tid efter det<br />

pågældende forsøg er lavet. (Rapporterne skal bl.a. bruges i eksamenssituationen).<br />

For at kunne skrive en fyldig rapport skal man have gjort personlige notater under udførelsen af et<br />

forsøg. Disse personlige notater er kun til en selv og behøver derfor ikke være så formfuldendte,<br />

men dog alligevel så klare og tydelige at de giver et godt grundlag for rapporten. Heri nedskrives<br />

fremgangsmåde, eventuelle ændringer i forhold til vejledningen, kladde til resultater (gerne i<br />

skemaform), stikord om resultaterne og eventuelle spørgsmål og konklusioner man kommer i<br />

tanke om undervejs. Ofte vil det være en god idé at styre notaterne efter de samme punkter som<br />

en rapport senere skal bygges op over.<br />

En biologirapport skal give læseren svar på følgende:<br />

Hvad har vi undersøgt?<br />

Hvordan er forsøget udført?<br />

Hvilke resultater er der kommet ud af det?<br />

Hvilken betydning kan det have?<br />

Rapporten opbygges efter nedenstående punkter i den angivne rækkefølge:<br />

Forsøgets titel: Der laves en forside med forsøgets titel, nummer, navn og holdnummer. Hvis I<br />

arbejder flere sammen skrives gruppens navne på.<br />

Forsøgets formål: Her noteres formålet med forsøget. Ofte vil der være en hypotese, der skal<br />

afprøves, men formålet kan også være at anvende noget specielt apparatur.<br />

Forsøgets hypotese: Ofte kan det være godt at formulere en eventuel hypotese som et<br />

selvstændigt afsnit.<br />

Teori til forsøget: I dette afsnit skal du i en kortfattet form præsentere den teori der hører til<br />

forsøget. Undlad at skrive afsnit direkte af fra lærebogen, prøv i stedet selv at formulere teorien i<br />

dit eget sprog. Husk også at præsentere de centrale begreber, der knytter sig til emnet.<br />

Materialer: Under dette punkt anføres hvilke dyr/planter der er anvendt, hvilke kemikalier der er<br />

brugt samt anvendt apparatur. Hvis der ikke er afvigelser fra den udleverede øvelsesvejledning,<br />

kan du nøjes med at henvise hertil (husk at vedlægge vejledningen).<br />

4


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Fremgangsmåde: Under dette punkt beskrives, hvordan forsøget er udført. Gør det kort og klart<br />

og i logisk rækkefølge. Skriv hvad du/ gruppen har gjort, dvs. brug jeg form. Det kan i mange<br />

tilfælde være en fordel at tegne forsøgsopstillingen for at gøre tingene mere overskuelige.<br />

Resultater: Alle iagttagelser og målinger (data) skal naturligvis med i rapporten.I det omfang det er<br />

rimeligt, skal resultaterne af hensyn til overskueligheden anføres i skemaform, tabelform og i<br />

kurveform.<br />

Afbildning af resultater/kurvetegning:<br />

- Giv figurer og tabeller en titel, samt en kort tekst, der fortæller, hvad kurven viser.<br />

- Ved tegning af kurver vælges en hensigtsmæssig inddeling af akserne.<br />

- Angiv benævnelse og enheder på alle akser.<br />

- Markér punkterne tydeligt på kurven, afvigende resultater skal også anføres.<br />

- Få punkter forbindes med rette linjer - mange punkter tegnes som blød kurve.<br />

- Hvis værdier mangler stiples linjen.<br />

- To kurver der skal sammenlignes bør altid have samme inddeling.<br />

Fejlkilder: Her anføres overvejelser om fejlkilder og usikkerheder under forsøgets udførelse. Ideer<br />

til forbedringer eller udvidelse af forsøget kan ligeledes beskrives her.<br />

Diskussion: Under dette punkt diskuteres forsøgsresultaterne (både de forventede og de<br />

uventede). Dette gøres ved, at man analyserer og tolker de opnåede resultater. Du bør besvare<br />

følgende spørgsmål:<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

Har forsøget vist, hvad man teoretisk kunne forvente (er hypotesen bekræftet)?<br />

Er formålet/formålene med forsøget blevet opfyldt?<br />

Kan fejlkilder forklare eventuelle afvigelser?<br />

Er alle nødvendige kontrolforsøg blevet udført?<br />

Ofte indeholder den trykte vejledning nogle diskussionsspørgsmål, der skal besvares. Sådanne<br />

spørgsmål skal tjene som inspiration og skal derfor ikke besvares med ja/nej, men indgå i en<br />

samlet diskussion af data.<br />

Konklusion: Som afslutning på rapporten anføres den konklusion, som kan drages ud fra<br />

forsøgsresultaterne. Ofte vil det være en stillingtagen til den hypotese, som blev efterprøvet i<br />

forsøget. Mens diskussionen er fyldig og bredt formuleret, skal konklusionen være kortfattet og<br />

formuleret så præcist som muligt. Konklusionen skal være en konklusion på det der var forsøgets<br />

formål.<br />

Litteratur: Her anføres den litteratur, der har været anvendt ved udarbejdelse af såvel forsøget<br />

som rapporten.<br />

5


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Eksperiment nr.:<br />

Bestemmelse af primærproduktionen<br />

ved O 2 - metoden<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

6


VUC Århus<br />

Øvelsevejledning: Bestemmelse af primærproduktionen ved O 2 - metoden.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundsstof:<br />

Fotosyntese og respiration, planternes primærproduktion.<br />

Teori:<br />

Grønne planter er i stand til at danne glukose ud fra kuldioxid og vand, samt energi i form af sollys.<br />

Dette foregår i planternes grønkorn ved processen fotosyntese. Planterne optager kuldioxid<br />

gennem deres spalteåbninger, som oftest sidder på undersiden af bladet. Vand optages gennem<br />

rødderne sammen med de næringssalte planten har brug for, til at danne alle de organiske stoffer<br />

der indgår i dens opbygning.<br />

Hos vandplanter er den mest anvendte kulstofkilde HCO 3 - . Hydrogencarbonat-ionen fremkommer<br />

når CO 2 opløses i vand (kulsyres ligevægtssystem). At vandplanterne kan udnytte<br />

hydrogencarbonat-ionen til fotosyntesen skyldes, at de har et enzym der katalyserer processen:<br />

2 HCO 3<br />

-<br />

CO 2 + CO 3 -- + H 2 O<br />

den frigjorte CO 2 udnyttes herefter til fotosyntesen.<br />

Da planterne er første led i en fødekæde, kaldes de for primærproducenter. Planter har imidlertid<br />

brug for energi til forskellige livsprocesser, den får de ved at udføre en respiration.<br />

Respirationsprocessen foregår i plantens mitochondrier, som ligger i cellens cytoplasma. Ved<br />

respirationen kan planten ved brug af glukose og ilt frigøre energien i glukosen.<br />

Fotosyntesen : 6CO 2 +6H 2 O +lysenergi C 6 H 12 O 6 +6O 2<br />

Respirationen : C 6 H 12 O 6 + 6O 2 6CO 2 + 6H 2 O + energi i form af ATP<br />

Bemærk fotosyntesen er en opbygningsproces, hvor der opbygges organiskstof i form af glukose,<br />

mens respirationen er en nedbrydningsproces, hvor den dannede glukose nedbrydes og omsættes<br />

til energi i form af ATP.<br />

ATP, Adenosin-Tri-Phosfat er den universelle energiform i cellen.<br />

Den totale mængde organisk stof, som planten har dannet ved fotosyntesen kaldes<br />

bruttoprimærproduktionen (BPP). Den del af produktionen, der er tilbage når planten har brugt<br />

energi til egne livsprocesser ved respiration (R), kaldes nettoprimærproduktionen (NPP). Det er<br />

således nettoprimærproduktionen som kan føres videre i fødekæden. Primærproduktionen<br />

opgives ofte pr. tidsenhed (år) og pr. arealenhed (km 2 ).<br />

Følgende sammenhæng haves: BPP = NPP + R, NPP kaldes også for tilvæksten<br />

7


VUC Århus<br />

Formål:<br />

At bestemme en vandplantes primærproduktion i løbet af et døgn, samt iagttage under hvilke<br />

forhold planten udskiller O 2 og optager O 2 .<br />

Lab.B11<br />

Materialer:<br />

Til forsøget benyttes vandplanter, da disse er lettere at arbejde med. Vandplanter har ingen<br />

spalteåbninger, da bladpladerne kun er få cellelag tykke. Læg eventuelt et blad under mikroskopet<br />

og se på grønkorn og cytoplasmastrømninger.<br />

to portioner afvejet vandplante (Elodea)<br />

tre Bluecap flasker 500ml<br />

vand fra hanen<br />

evt. mineralvand (CO 2 )<br />

iltmåler<br />

staniol<br />

stor plastikspand med vand<br />

Metode:<br />

Til at bestemme en plantes primærproduktion i et soldøgn, vil vi benytte den såkaldte O 2 -metode.<br />

Metoden forudsætter at planten optager O 2 fra vandet til sin respiration og udskiller O 2 ved sin<br />

fotosyntese. Ændringen i vandets oxygenindhold, fra start til slut, kan på den måde føre frem til en<br />

værdi for plantens nettoprimærproduktion og respiration.<br />

Der opstilles tre forsøg:<br />

Forsøg Plante Vand CO 2 Lys O 2 indhold start O 2 indhold slut<br />

kontrolflaske + +<br />

lysflaske + + + +<br />

mørkeflaske + + + <br />

Der måles iltindhold inden flaskerne lukkes. Flaskerne skal lukkes så der ikke er luftlommer, dette<br />

gøres ved at skrue hætten på under vand. Stil flaskerne i samme miljø (lys i 12 timer et soldøgn).<br />

Beregning:<br />

Følgende sammenhæng gælder: BPP = NPP + R, hvor man kan finde:<br />

NPP = lysflaske/slut – lysflaske/start (mg O 2 /liter )<br />

R = mørkeflaske/start – mørkeflaske/slut (mg O 2 /liter)<br />

Det er nu muligt at omregne mængden af oxygen til milligram glukose ud fra følgende<br />

sammenhæng:<br />

6CO 2 + 6H 2 O + lysenergi C 6 H 12 O 6 + 6O 2<br />

264g/mol 108g/mol 180g/mol 192g/mol<br />

Ud fra fotosynteseligningen og de forskellige reaktanter- og produkters molmasse, finder vi<br />

at 1g oxygen udskilt ved fotosyntesen svarer til 0,94g glukose da forholdet mellem dem er<br />

180g/mol :192g/mol = 0,94.<br />

8


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Nævn forskellige forhold, der har betydning for primærproduktionens størrelse.<br />

Hvilke næringsalte har planterne behov for og hvad bruger planten dem til?<br />

Hvor meget energi går der til plantens vækst og til dens nødvendige livsprocesser?<br />

Hypotese:<br />

Hvad forventer du der vil ske med O 2 indholdet i de tre forsøgsflasker.<br />

Materialer/metode:<br />

Skriv kun hvis der er ændringer i forhold til øvelsesvejledningen. ændringer<br />

Resultatbehandling:<br />

Opstil et skema med forsøgsresultaterne.<br />

Beregn NPP udtrykt som mg O 2 produceret/gram plante/soldøgn.<br />

Beregn R udtrykt som mg O 2 produceret/gram plante/soldøgn.<br />

Beregn BPP udtrykt som mg O 2 produceret/gram plante/soldøgn.<br />

Omregn den mængde oxygen, der er et udtryk for NPP, til mængden af glukose produceret<br />

pr.gram plante i et soldøgn.<br />

Udregn NPP (i gram glukose pr.gram plante) på årsbasis, idet du antager at fotosyntesen kan finde<br />

sted i 240 dage på et år.<br />

Beregn hvor stor en procentdel af energien (proportional med mg O 2 ) der er gået til plantens<br />

respiration henholdsvis nettoprimærproduktion.<br />

Diskussion:<br />

1. Forklar hvilke processer der er foregået i de to glas med planter<br />

2. Hvorfor er det nødvendigt at afveje plantematerialet?<br />

3. Hvorfor må der ikke være luftlommer i glassene ved start?<br />

4. Hvorfor laver vi forsøget med vandplanter?<br />

5. Hvor stor en procentdel udgør den energi der går til henholdsvis respirationen og tilvæksten<br />

(NPP) Stemmer de fundne resultater overens med de teoretiske værdier?<br />

Konklusion:<br />

Fejlkilder: Er der fejlkilder i dette forsøg?<br />

9


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Forsøg med osmose<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

10


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Forsøg med osmose<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundsstof:<br />

Plantecellens opbygning, cellemembranens opbygning og transportformer gennem<br />

cellemembranen.<br />

Teori:<br />

Alle celler er afgrænset af en cellemembran. Membranen er fortrinsvis opbygget af fedtstoffer<br />

(fosfolipider) og proteiner og er karakteriseret ved, at den kun tillader visse stoffer at passere<br />

igennem (kaldes semipermeabel). Cellemembranens egenskaber gør det muligt for cellen at<br />

opretholde et indre miljø, der er forskelligt fra omgivelserne.<br />

Forskellige opløste stoffer kan bevæge sig gennem membranen på forskellig måde afhængig af<br />

deres størrelse eller andre egenskaber. Man taler her om forskellige transportformer gennem<br />

membranen.<br />

En af de mekanismer der driver stoffer gennem membranen er diffusion. Ved diffusion forstår<br />

man molekylernes egenbevægelse gennem membranen. Denne bevægelse er ikke<br />

retningsbestemt, men generelt vil et stof bevæge sig fra et sted med høj koncentration af det<br />

pågældende stof mod et sted med lav koncentration af stoffet. Molekylerne bevæger sig ad en<br />

koncentrationsgradient fra høj til lav koncentration. Et eksempel kunne være diffusionen af ilt fra<br />

lungerne til blodet.<br />

En særlig form for diffusion er bevægelse af vand gennem en cellemembran, dette fænomen<br />

kaldes for osmose. Forestil dig en celle omgivet ferskvand Cellens indre (cytoplasma) består af<br />

vand med opløste stoffer - det kan være sukker, salte eller proteiner. Da molekylerne i<br />

cytoplasmaet er for store til at gå gennem membranen, vil der ske det at vandet udenfor cellen vil<br />

bevæge sig gennem membranen.<br />

Da vandet bevæger sig ved hjælp af diffusion, vil vandets nettobevægelse være fra den side af<br />

membranen hvor koncentrationen af vand er høj til den side, hvor koncentrationen af vand er lav.<br />

Man siger vandet har bevæget sig ved osmose.<br />

Den mængde vand, der kan passere over membranen vil være bestemt af, hvor stor en<br />

koncentration der er af "osmotisk aktive stoffer" på de to sider af membranen. Med osmotisk<br />

aktive stoffer menes der stoffer, som ikke uden videre kan passere cellemembranen. Det tryk der<br />

opstår som følge af forskellen i koncentrationen af opløste stoffer på de to sider af<br />

cellemembranen kaldes det osmotiske tryk.<br />

Formål:<br />

• At påvise osmosefænomenet - vands diffusion fra en højere til en lavere<br />

koncentration af vand.<br />

• At undersøge hvilken sammenhæng, der er mellem vand-/salt-koncentration<br />

og vægtændringerne i vores kartoffel.<br />

• At undersøge hvilken koncentration af salt, der modsvarer koncentrationen inde i<br />

kartoffelcellerne.<br />

• At beregne det osmotiske tryk i en kartoffelcelle.<br />

Materialer:<br />

11


VUC Århus<br />

Kartofler, propbor (evt. kniv), saltopløsninger med forskellige koncentrationer, analysevægt,<br />

køkkenrulle, reagensglas (evt. små bægerglas).<br />

Lab.B11<br />

Fremstilling af saltopløsninger:<br />

Saltopløsningerne laves som fortyndinger af den mest koncentrerede opløsning, nemlig 8%<br />

saltopløsningen. Af denne 8 % “stamopløsning” laves 1 L (= 1000 mL) ved at opløse 80 gram<br />

salt (NaCl) i demineraliseret vand til det samlede rumfang er i alt 1L.<br />

Fortyndingerne foregår derefter efter skemaet:<br />

koncentration af<br />

færdig<br />

saltopløsning<br />

der skal bruges<br />

følgende rumfang 8%<br />

saltopløsning<br />

0% 0,0 mL 250 mL<br />

0,5% 15,6 mL 250 mL<br />

1,0% 31,3 mL 250 mL<br />

1,5% 46,9 mL 250 mL<br />

2,0% 62,5 mL 250 mL<br />

2,5% 78,1 mL 250 mL<br />

3,0% 93,8 mL 250 mL<br />

4,0% 125,0 mL 250 mL<br />

6,0% 187,5 mL 250 mL<br />

8,0% 250,0 mL --------<br />

+ en ukendt opl.<br />

der fortyndes op til et<br />

rumfang på i alt<br />

Metode:<br />

Hvert hold laver et antal propborkerner eller homogene kartoffelstykker svarende til antallet af<br />

saltopløsninger. Hvert af kartoffelstykkerne vejes omhyggeligt (3 decimaler), hvorefter de kommes<br />

ned i hvert sit reagensglas med hver sin saltkoncentration.<br />

Kartoflen dækkes med 20 mL saltopløsning i hvert glas.<br />

NB! Vægten af de enkelte kartoffelstykker noteres ned sammen med den saltkoncentration de<br />

hver især udsættes for.<br />

Glassene med kartoffelstykkerne står nu i køleskabet - overdækket med plastfilm eller lignende i<br />

et døgn. Herefter fiskes de op af glassene og vejes efter kort at have ligget til afdrypning (ikke<br />

klemme) på et stykke køkkenrulle.<br />

Resultatbehandling:<br />

Vægtændringen i % beregnes:<br />

(vægt efter - vægt før)<br />

vægt før<br />

x 100%<br />

Vægtændringen i % indskrives i en tabel og afbildes i et koordinatsystem med den procentiske<br />

vægtændring som funktion af saltkoncentrationen. Hvor X-aksen =saltkoncentration i % og Y-<br />

aksen= vægtændring.<br />

12


VUC Århus<br />

Den saltkoncentration, der modsvarer koncentrationen af osmotisk aktive stoffer inde i<br />

kartoffelceller bestemmes ud fra grafen. Kaldes også for den isotoniske saltopløsning.<br />

Lab.B11<br />

Beregning af det osmotiske tryk i kartoffelcellerne:<br />

Ved hjælp af nedenstående formel kan det osmotiske tryk (Ψ) i en kartoffelcelle bestemmes:<br />

Ψ = iCRT, hvor<br />

i = 1,9 (en konstant for en næsten ideal opløsning)<br />

R= 0,0821 L atm K -1 mol -1 (gaskonstanten)<br />

T= 298K (temperaturen i Kelvingrader)<br />

C er den molære koncentrationen af NaCl<br />

( M NaCl = 58,5 g/mol )<br />

Den molære koncentration, C, beregnes ud fra den isotoniske saltopløsning som:<br />

% salt opløsning aflæst omregnet til gram salt / liter<br />

M NaCl<br />

13


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Beskriv hvad der vil ske med en celle under følgende forhold:<br />

• Cellen placeres i en vandigopløsning hvis koncentration af opløste stoffer er højere end<br />

inde i cellen (hypertonisk opløsning)<br />

• Cellen placeres i en vandigopløsning hvis koncentration af opløste stoffer er lavere end<br />

inde i cellen (hypotonisk opløsning)<br />

• Cellen placeres i en vandigopløsning der netop svarer til cellen egen koncentration af<br />

opløste stoffer (isotonisk opløsning)<br />

Hypotese:<br />

Formuler ud fra ovenstående teori en hypotese til forsøget.<br />

Resultater:<br />

Tegn grafen og aflæs ved hvilken saltkoncentration opløsningen er isotonisk.<br />

Find ligeledes koncentrationen af den "ukendte opløsning".<br />

Diskussion / konklusion:<br />

Hvor stort var det osmotiske tryk i cellen?<br />

Gør rede for hvorfor plantecellen er i stand til at modstå så et højt tryk?<br />

Forklar hvordan koncentrationen af opløste næringssalte i jorden har betydning for plantens evne<br />

til at optage vand gennem rodnettet.<br />

Diskuter princippet bag saltning/syltning ved konservering af fødevarer.<br />

Har du forslag til udvidelse/ændringer af forsøget?<br />

14


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Metode til påvisning af stivelse og maltose<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

15


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Metode til påvisning af stivelse og maltose.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundstof:<br />

kulhydraters opbygning, enzymer og fordøjelsesprocessen.<br />

Teori:<br />

Når vi i kosten indtager kulhydrater, skal disse spaltes inden kroppen kan udnytte dem. Denne<br />

spaltning er en del af vores fordøjelse. Spaltningen af kulhydrater starter allerede i mundhulen,<br />

hvor der med udskillelsen af spyt også tilsættes et enzym, spytamylase. Da fødens opholdstid i<br />

munden er begrænset fortsætter fordøjelsen af kulhydrater, når føden kommer ned i<br />

tolvfingertarmen og<br />

tyndtarmen, hvor der udskilles en række enzymer, som nedbryder kulhydraterne til den mindste<br />

enhed nemlig monosakkarider.<br />

Føden indeholder forskellige typer af kulhydrater:<br />

Monosakkarider:<br />

Simple sukkerarter som består af et sukkermolekyle f.eks.glukose, fruktose og galaktose.<br />

Disakkarider:<br />

Sukkerarter der er opbygget af to monosakkarider, f.eks. maltose (2 glukose), sakkarose<br />

(glukose+fruktose) eller laktose (glukose + galaktose)<br />

Polysakkarider:<br />

Er store molekyler der er opbygget af mange tusinde glukose molekyler f.eks. stivelse (amylose)<br />

og cellulose (kostfibre/plantecellevægge).<br />

Karakteristisk for de simplekulhydrater er, at de smager sødt mens polysakkariderne ikke rigtig<br />

smager af noget - tænk selv efter!<br />

Formål:<br />

Når man laver forsøg med enzymer, har man brug for at kunne påvise, at en spaltning har fundet<br />

sted f.eks. i forbindelse med nedbrydning af stivelse.<br />

Stivelse + spytamylase maltose<br />

maltose + maltase 2 glukose<br />

substrat enzym produkt substrat enzym produkt<br />

Øvelsens formål er at afprøve en metode til påvisning af forskellige kulhydrater.<br />

Resultatet af dette forsøg kan benyttes, hvis man arbejder med enzymet spytamylase.<br />

Spytamylase spalter stivelse til maltose.<br />

Bemærk: De fleste enzymer navngives efter ordstammen til den forbindelse eller reaktion de<br />

deltager i, tilføjet endelsen -ase, f.eks. spalter enzymet maltase kulhydratet maltose.<br />

Materialer:<br />

16


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

10 små reagensglas 1% stivlesesopløsning<br />

En glasspatel til omrøring<br />

1% maltose-opløsning<br />

En gryde med kogende vand<br />

JJK-opløsning (jod-jod-kalium)<br />

Et bægerglas til spyt<br />

Benedict- opløsning<br />

En pipette<br />

Metode:<br />

TEST FOR STIVELSE:<br />

Opstil 5 glas af følgende indhold (der tilsættes 2 mL opløsning i hvert glas):<br />

glas 1 reagens (JJK)<br />

glas 2 vand, glas 3 stivelse, glas 4 maltose, glas 5 spyt.<br />

Noter farven på glassets indhold og tilsæt JJK til glassene 1-5.<br />

Noter farven efter reaktion.<br />

Glas nr. Indhold Farve start (uden JJK) Farve slut (med JJK)<br />

1 JJK<br />

2 Vand+JJK<br />

3 Stivelse +JJK<br />

4 Maltose + JJK<br />

5 Spyt+JJK<br />

TEST FOR MALTOSE:<br />

Opstil dernæst 5 glas med følgende indhold:<br />

glas 1 reagens (Benedict )<br />

glas 2 vand, glas 3 stivelse, glas 4 maltose, glas 5 spyt.<br />

Tilsæt Benedict til opløsningerne og noter farven på glassets indhold ved start<br />

Stil glassene i varmebad og kog i ca. 1minut. Noter farven herefter.<br />

Glas nr. Indhold Benedicts farve ved start<br />

(inden kogning)<br />

1 Benedict<br />

2 Vand+Benedict<br />

3 Stivelse +Benedict<br />

4 Maltose + Benedict<br />

5 Spyt+Benedict<br />

Benedicts farve ved slut<br />

(efter kogning)<br />

17


VUC Århus<br />

Diskussion:<br />

Lab.B11<br />

1. Hvilket af de to reagenser (JJK eller Benedict) kan bruges til at påvise stivelse og hvilken<br />

farve får prøven?<br />

2. Hvilket reagens kan bruges til at påvise maltose og hvilen farve får prøven?<br />

3. Antag vi har opstillet et forsøg, hvor man har haft et glas med stivelse og spytamylase<br />

(spyt). Forklar hvad der vil ske i glasset og hvilken farve man vil få ved test for stivelse og<br />

test for maltose, hvis al stivelsen er blevet spaltet?<br />

4. Hvorfor opstilles der et glas kun med spyt?<br />

5. Hvorfor opstilles der et glas kun med vand?<br />

Konklusion:<br />

18


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Forsøg med enzymet spytamylase<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

19


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Forsøg med enzymet spytamylase.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundstof:<br />

Proteiner - og kulhydraters opbygning, enzymer og fordøjelsesprocessen.<br />

Teori:<br />

Enzymer er proteiner, som katalyserer kemiske reaktioner i den levende celle.<br />

En katalysator er i stand til at ændre den hastighed, hvormed en kemisk reaktion foregår.<br />

Det vil i praksis sige, at de forskellige kemiske reaktioner i cellen kun kan foregå, fordi der er<br />

enzymer tilstede. Enzymerne bliver ikke forbrugt under processen og fremtræder efter endt<br />

reaktion i uændret form.<br />

Et enzym er mere eller mindre specifikt og deltager kun i en eller få beslægtede processer.<br />

De fleste enzymer navngives efter ordstammen til den forbindelse eller reaktion de deltager i,<br />

tilføjet endelsen -ase, f.eks. spalter enzymet maltase kulhydratet maltose.<br />

To andre begreber er værd at kende nemlig substrat og produkt. Man kan sige, at den forbindelse<br />

som enzymet binder sig til kaldes substratet og det, der kommer ud af reaktionen kaldes<br />

produktet.<br />

Maltose + enzym 2 glukose + enzym<br />

substratet<br />

produktet<br />

Enzymerne kan opdeles i to kategorier: endoenzymer, som virker inde i cellen og ektoenzymer<br />

som udskilles af cellen og virker uden for denne (f.eks. fordøjelsesenzymerne).<br />

Enzymerne er opbygget af en eller flere kæder af proteiner. Herforuden indgår der ofte et såkaldt<br />

coenzym (ofte vitamindel) og en metalion (f.eks. Mg 2+ , Mn 2+ , Fe 3+ eller Zn 2+ ).<br />

apoenzym + coenzym = holoenzym<br />

proteindel vitamindel Enzymet<br />

Enzymers aktivitet afhænger af flere forskellige forhold. Typisk kan man sige, at de forhold der kan<br />

ændre et proteins struktur også vil have betydning for enzymets evne til at katalysere en reaktion.<br />

Her skal nævnes tre forhold som har betydning: temperatur, pH og tilstedeværelsen af tungmetalioner<br />

(f.eks. Hg 2+ , Cd 2+ og Cu 2+ ). Både temperatur og pH har indvirkning på proteindelens struktur<br />

og tungmetalioner kan gå ind og påvirke det reaktiveområde i enzymet. Endvidere har mængden<br />

af enzym og koncentrationen af substrat selvfølgelig også betydning for reaktionshastigheden.<br />

20


VUC Århus<br />

Formål:<br />

At undersøge forskellige faktorers indvirkning på fordøjelsesenzymet spytamylase.<br />

Enzymet findes i spyt hos mennesker og andre pattedyr og påbegynder, allerede i munden,<br />

nedbrydningen af stivelse (amylose) til simple sukkerarter (maltose).<br />

I dette forsøg undersøges hvordan temperatur, pH og kobbersulfat (CuSO 4 ) virker på<br />

enzymaktiviteten.<br />

Materialer til forsøget:<br />

Spyt (læs mundvand)<br />

1% stivelsesopløsning<br />

Iod-iodkalium opløsning<br />

Benedictopløsning<br />

0,1M HCl (saltsyre)<br />

0,5M CuSO 4<br />

pH-sticks<br />

Bægerglas til spyt<br />

reagensglas og reagensglasstativ<br />

mærkningstape, glasspatel til omrøring<br />

engangspipette til spyt<br />

termobade ved forskellige temperaturer<br />

køleskab<br />

gryde med kogende vand<br />

Metode:<br />

Forsøg med temperaturens indvirkning på enzymaktiviteten:<br />

Enzymaktiviteten undersøges ved et udvalg af temperaturer mellem 5C og 100C .<br />

Til hver temperatur opstilles 3 reagensglas:<br />

Lab.B11<br />

Glas 1 indeholder 2 ml spyt<br />

Glas 2 indeholder 4 ml stivelsesopløsning<br />

Glas 3 indeholder 4 ml stivelsesopløsning.<br />

Husk at mærke glassene med<br />

navn, nummer, indhold, m.m.<br />

temperatur navn<br />

Lad glassene stå i mindst 5 minutter og akklimatiseret ved forsøgstemperaturen.<br />

Herefter overføres de 4 ml stivelse fra glas 2 til glasset med spyt (glas1)- rør rundt.<br />

Glas 3 tilsættes ikke spyt (kontrolglas)<br />

Reaktionen får nu lov at forløbe i ca.15 minutter ved den valgte forsøgstemperatur.<br />

Afkøl de glas der har stået ved høj temperatur i et par minutter.<br />

Fordel indholdet fra hvert forsøgsglas (1-3) i to nye glas.<br />

Undersøg nu indholdet i glassene vha. Iod - og Benedict prøven som i det indledende<br />

forsøg.*)<br />

OBS: I forsøget ved 5C er det vigtigt at lave analysen på indholdet straks, så enzymerne ikke<br />

når at blive aktive dvs. Benedictprøven sættes i spilkogende vand!!!<br />

*) Forsøg med påvisning af stivelse og maltose.<br />

21


VUC Århus<br />

Forsøg med pH’s indvirkning på enzymaktiviteten (37C).<br />

Lab.B11<br />

Opstil 3 glas på følgende måde:<br />

Glas 1 indeholder 2 ml spyt + 2ml HCl<br />

Glas 2 indeholder 4 ml stivelsesopløsning<br />

Glas 3 indeholder 4 ml stivelsesopløsning.<br />

Husk at mærke glassene med<br />

navn, nummer, indhold m.m.<br />

Lad glassene stå i mindst 5 minutter og akklimatiseret ved 37C.<br />

Herefter overføres de 4 ml stivelse fra glas 2 til glasset med spyt+ HCl (glas1)<br />

omrør og mål pH i blandingen- lad blandingen stå i 5 minutter.<br />

Glas 3 tilsættes ikke spyt (kontrolglas)<br />

Reaktionen får nu lov at forløbe i ca.15 minutter ved 37C<br />

Fordel indholdet fra hvert forsøgsglas (1-3) i to nye glas.<br />

Undersøg nu indholdet i glassene vha. Iod - og Benedict prøven som i det indledende<br />

forsøg.*)<br />

OBS. Mål pH i opløsningen før og efter tilsætning af syren!<br />

Forsøg med kobbersulfats (CuSO 4 ) indvirkning på enzymaktiviteten (37C).<br />

Opstil 3 glas på følgende måde:<br />

Glas 1 indeholder 2 ml spyt + 1ml CuSO 4<br />

Glas 2 indeholder 4 ml stivelsesopløsning<br />

Glas 3 indeholder 4 ml stivelsesopløsning.<br />

Husk at mærke glassene med<br />

navn, nummer, indhold, m.m.<br />

temperatur og navn<br />

Lad glassene stå i mindst 5 minutter og akklimatiseret ved 37C.<br />

Herefter overføres de 4 ml stivelse fra glas 2 til glasset med spyt+CuSO 4 (glas1)<br />

- rør rundt og lad blandingen stå i 5 minutter.<br />

Glas 3 tilsættes ikke spyt (kontrolglas)<br />

Reaktionen får nu lov at forløbe i ca.15 minutter ved 37C<br />

Fordel indholdet fra hvert forsøgsglas (1-3) i to nye glas.<br />

Undersøg nu indholdet i glassene vha. Iod - og Benedict prøven som i det indledende<br />

forsøg.*)<br />

I ventetiden kan du formulere en hypotese og lave resultatskema.<br />

22


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Beskriv kort fødens vej gennem fordøjelsessystemet og giv eksempler på mekanisk nedbrydning og<br />

andre enzymer end dem du har arbejdet med i forsøget.<br />

Hypotese:<br />

Argumenter for hvilke resultater du forventer i de enkelte forsøg.<br />

Materialer/metode:<br />

Skriv kun hvis der er ændringer i frohold til øvelsesvejledningen.<br />

Resultater:<br />

Opstil et skema med forsøgsresultaterne<br />

Diskussion/ spørgsmål til forsøget:<br />

1. Forklar hvordan man af forsøgsresultaterne kan se, om enzymet er aktivt eller inaktivt?<br />

2. Gør rede for aktiviteten ved de forskellige forsøgstemperaturer og diskuter resultaterne i<br />

forhold til teorien.<br />

3. Ved hvilken pH er enzymet spytamylase normalt aktivt?<br />

4. Forklar hvilken betydning en ændring i pH vil have på enzymaktiviteten og gør rede for<br />

resultaterne i dit eget forsøg.<br />

5. Hvad sker der med enzymaktiviteten, når der tilsættes CuSO 4 ?<br />

6. Hvorfor er der i opstillet glas med og uden spyt ved hvert forsøg?<br />

Konklusion:<br />

Fejlkilder: Angiv her hvilke fejlkilder har haft indflydelse på dine resultater.<br />

23


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Bestemmelse af kondital<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

24


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Bestemmelse af kondital<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundstof:<br />

Blodkredsløbet, lungernes opbygning og funktion, musklernes energiomsætning under arbejde,<br />

konditionstræning.<br />

Teori:<br />

Konditallet benyttes som et udtryk for hvor god kroppen er til at udføre aerobt arbejde, fx løbe<br />

eller cykle.<br />

Evnen til at udføre dette arbejde afhænger af lungernes evne til at optage luftens ilt, hjertet og<br />

kredsløbets evne til at transportere ilten ud til musklerne og musklernes evne til at udnytte den<br />

tilførte ilt ved arbejde. Forsøget bygger på den teori, at der er en lineær sammenhæng mellem de<br />

tre størrelser: iltoptagelse, pulsfrekvens og arbejdsintensitet, og konditallet beregnes som den<br />

maksimale iltoptagelse pr. minut pr. kilo legemsvægt.<br />

For at bestemme den maksimale iltoptagelse skal man finde den maksimale arbejdsintensitet,<br />

hvilket kan gøres ved at ”køre sig selv helt ud” på kondicyklen (ergometercyklen). Der findes dog<br />

mindre anstrengende metoder, hvor man arbejder med submaksimal intensitet ( = ”under<br />

maksimal” intensitet) og det er denne type konditest, vi skal benytte os af her.<br />

Testen udføres som en to-punktstest (men kan også udføres som en tre-punktstest, hvor<br />

cykelarbejde(max) aflæses grafisk – se senere).<br />

Forsøget udføres på en kondicykel (ergometercykel). Umiddelbart inden testen skal<br />

forsøgspersonen varme op ved at cykle med meget lav belastning i 4-5 minutter. Under selve<br />

forsøget skal forsøgspersonen cykle i fem minutter på to forskellige belastninger (de kaldes<br />

arbejde 1 og arbejde 2). Kadencen skal være 60 omdrejninger pr minut (brug evt. en metronom).<br />

Den første belastning skal være således at pulsen stabiliseres i området 120-140 slag/min efter ca.<br />

5 minutters cykling.<br />

Den anden belastning skal være således at pulsen stabiliseres i området 150-170 slag/min efter<br />

yderligere 5 minutters cykling<br />

Testen giver det bedste resultat, hvis de to pulsværdier ikke kommer til at ligge for tæt. Fx vil 130<br />

og 160 være fint.<br />

Ved tre-punktstest vælges pulsværdier på: arbejde 1) 110-130 slag/min, arbejde 2) 130-150<br />

slag/min, arbejde 3) 150-170 slag/min, fx 120, 140 og 160<br />

Formål:<br />

Formålet med dette eksperiment er at beregne forsøgspersonernes kondital.<br />

Materialer:<br />

Ergometercykel (kondicykel)<br />

Pulsur med tilhørende elektrode-/sender-rem<br />

pc med software til pulsur<br />

træningstøj/T-shirt<br />

25


VUC Århus<br />

Fremgangsmåde:<br />

Cyklen indstilles, så den er behagelig at sidde/cykle på.<br />

Lab.B11<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

Pulsuret og dets senderrem monteres. Senderremmen placeres om brystkassen i<br />

hjertehøjde og fugtes så der er bedst mulig kontakt med huden og det sikres at der et<br />

forbindelse mellem sender og ur (se særskilt vejledning). Pulsregistreringen startes.<br />

Forsøgspersonen varmer nu op ved at cykle i ca. 5 minutter ved lav belastning (50-75 watt<br />

afhængig af træningstilstand, vægt og køn).<br />

I samråd med læreren bestemmes første belastning ud fra køn, alder, kropsvægt og puls<br />

ved opvarmningens ophør. Belastningen indstilles på cyklen. Køn, kropsvægt, alder og<br />

belastningen noteres i nedenstående skema!!<br />

Der cykles nu i 5 minutter med den indstillede belastning. Det bestræbes at holde den<br />

samme kadence under hele eksperimentet – fx 60 omdrejninger/minut. Er belastningen<br />

ikke for høj, vil pulsen nogenlunde have stabiliseret sig på en bestemt værdi efter de 5<br />

minutter.<br />

I samråd med læreren bestemmes anden belastning. Belastningen noteres i nedenstående<br />

skema. Belastningen indstilles på cyklen og forsøgspersonen cykler nu i 5 minutter.<br />

Stabiliserer pulsen sig ikke, er belastningen måske valgt for høj. Lad forsøgspersonen hvile<br />

til pulsen er på ca. 100 slag/<br />

min og fortsæt derefter forsøget med en lavere belastning i samråd med læreren. Der<br />

cykles nu i 5 minutter. Pulsregistreringen fortsættes endnu 5 minutter efter af cyklingen er<br />

afsluttet<br />

Pulsregistreringen afsluttes og pulsurets data overføres nu til pc’en (se vejledning i<br />

laboratoriet) og de opsamlede data udskrives og vurderes. Der skal findes to stabile<br />

pulsniveauer. Et for hver arbejdsintensitet. De fundne værdier noteres i nedenstående<br />

skema.<br />

Konditallet kan nu beregnes.<br />

Forslag til resultatskema:<br />

Køn Alder Vægt<br />

kg<br />

Belastning<br />

1. Arbejde<br />

watt<br />

Belastning<br />

2. Arbejde<br />

watt<br />

Belastning<br />

3. Arbejde<br />

watt<br />

Puls<br />

1.<br />

Arbejde<br />

slag/min<br />

Puls<br />

2.<br />

Arbejde<br />

slag/min<br />

Puls<br />

3. Arbejde<br />

slag/min<br />

Forsøgsperson<br />

Maks.-<br />

puls.<br />

slag/min<br />

Aktivitetsniveau<br />

Beregning af kondital:<br />

Til beregningerne skal den anslåede maksimale puls bruges:<br />

maksimale puls = 208 – (0,7 x alder).<br />

<br />

Herefter skal det maksimale cykelarbejde i watt findes. Det kan gøres på to måder<br />

a) ved at indsætte i denne formel (ved topunktstest):<br />

26


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

cykelarb.(max) =cykelarb(1) +<br />

puls max −puls cykelarb .1<br />

puls cykelarb .2 −puls cykelarb .1<br />

x(cykelarb. (2) − cykelarb. (1))<br />

b) grafisk ved at afbilde de to fundne pulsværdier som funktion af de tilsvarende<br />

arbejdsintensiteter i et koordinatsystem på et stykke millimeterpapir (ved både topunktstest<br />

og tre-punktstest). De to (tre) fundne punkter forbindes og stregen<br />

forlænges (ekstrapoleres) op til den skærer en vandret streg svarende til den<br />

beregnede maksimale puls. Fra skæringen mellem de to linjer tegnes en lodret linje ned<br />

på x-aksen.<br />

Det maksimale cykelarbejde (cykelarb.(max)) aflæses, hvor den lodrette linje skærer x-<br />

aksen.<br />

<br />

Det maksimale cykelarbejde (i watt) er imidlertid kun en mindre del af det maksimale<br />

arbejde kroppen udfører, da en stor del af musklernes arbejde bruges til fx<br />

gnidningsmodstanden i musklerne. Den øgede respiration og hjertets øgede aktivitet<br />

kræver også ilt. Ved cykling er den såkaldte nyttevirkning 23%. Det vil sige, at kun 23% af<br />

det arbejde musklerne udfører går til at cykle. Resten bliver til varme. Det maksimale<br />

arbejde kan derfor udregnes ud fra det maksimale cykelarbejde på følgende måde:<br />

Maksimale arbejde (i watt) = maksimale cykelarbejde (i watt) x 100/23<br />

<br />

Det maksimale arbejde omregnes til kilojoule pr. minut (kJ/min)ved at gange med 60 og<br />

dividere med 1000 (da en watt svarer til en joule pr. sekund).<br />

Maksimale arbejde (i kilojoule pr minut) = maksimale arbejde (i watt) x 60/1000<br />

<br />

Da der for hver liter ilt, der optages i kroppen, frigives 21,1 kJ, og da hvilestofskiftet svarer<br />

til et iltoptag på 0,25 liter O 2 /min, kan den maksimale iltoptagelse beregnes således:<br />

VO 2 (max) (i Liter/min) = Maksimale arbejde (i kJ/min)/21,1 kJ/Liter + 0,25 Liter/min<br />

<br />

Den maksimale iltoptagelse pr minut omregnes til kondital ved at dividere med<br />

kropsvægten og gange med tusinde (for at få værdien i mL ilt pr minut pr kilo):<br />

Kondital (mL ilt pr minut pr kilo) = VO 2 (max)(i liter pr minut) x 1000 / kropsvægt.<br />

27


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

1. Forklar kort hjertets og kredsløbets funktion og opbygning.<br />

2. Hvorfor har de arbejdende muskler brug for rigelig blodtilførsel?<br />

Hypotese:<br />

Fremgangsmåde:<br />

Skriv kun hvis den anvendte fremgangsmåde afviger fra vejledningens.<br />

Resultater:<br />

1. Forsøgsresultaterne skal indføres i resultatskema.<br />

2. Udprintede pulskurver vedlægges.<br />

3. Udregningerne af konditallet vises for en enkelt af forsøgsdeltagerne. De resterende<br />

kondital angives blot.<br />

Diskussion:<br />

1. Vurdér forsøgspersonernes kondital i forhold til normalværdierne (skema udleveres i<br />

laboratoriet).<br />

2. Er der en sammenhæng mellem forsøgspersonernes aktivitetsniveau og kondital?<br />

3. Hvilken effekt vil du vurdere at rygning har på ens kondital? Begrund!<br />

4. Hvorfor skal man dividere med kropsvægten for at finde konditallet?<br />

5. Hvorledes kan man forbedre sit kondital?<br />

6. Hvilken effekt tror du en forbedret kondition vil have på pulsen ved en bestemt<br />

arbejdsbelastning? Begrund!<br />

7. Forklar pulskurvens forløb. Hvor længe er pulsen om at indstille sig på et nyt<br />

aktivitesniveau? Er der her en sammenhæng med konditallet?<br />

8. Vurdér testens fejlkilder.<br />

28


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Måling af blodglukose-niveauet<br />

ved indtagelse af kulhydrater<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

29


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Måling af blodglukose-niveauet ved indtagelse af kulhydrater.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundsstof:<br />

kulhydraternes opbygning og fordøjelse, hormoner, regulering af blodglukosen, Glykæmisk index,<br />

diabetes.<br />

Teori:<br />

Alle kroppens celler har brug for energi blandt andet i form af glukose, især hjernen som er meget<br />

følsom, da den næsten udelukkende bruger glukose som energikilde.<br />

Endvidere er det vigtigt for cellernes indre miljø, at koncentrationen af glukose ikke svinger for<br />

meget, da glukosen er osmotisk aktiv.<br />

Når vi indtager kulhydrater nedbrydes de store kulhydrater blandt andet til glukose og fruktose,<br />

disse transporteres over i blodbanen og det er her reguleringen af blodglukosen (også kaldet<br />

blodsukkeret) starter.<br />

Efter et måltid vil koncentrationen af glukose i blodet være høj (op til 10 mmol/L) mellem<br />

måltiderne vil koncentrationen svinge mellem 3 og 6 mmol/L.<br />

Hvor meget blodglukosen stiger efter et kulhydratrigt måltid afhænger bl.a. af, hvilke typer<br />

kulhydrater man har spist, samt ens evne til at regulerer blodsukkerkoncentrationen. Tidligere<br />

troede man at stivelse var sundest, fordi den var længere tid om at blive fordøjet. Denne teori<br />

holder ikke, da der er rigeligt med fordøjelsesenzymer i tarmen. Derimod skyldes forsinkelsen<br />

snarere tilstedeværelsen af visse typer af kostfibre. Det har også vist sig at de forskellige<br />

monosakkarider ikke transporteres lige hurtigt fra tyndtarmen til blodbanen. Kartofler eller hvidt<br />

brød får således blodglukosen til at stige lige så hurtigt som ren glukose.<br />

To af de hormoner, der er ansvarlige for reguleringen af blodglukosen er insulin og glukagon.<br />

Begge hormoner produceres i bugspytkirtlens langerhanske øer i hhv. -cellerne og -cellerne.<br />

Insulin fremmer optagelsen af glukose i muskelcellerne, mens det påvirker levercellerne til at<br />

omdanne glukose til glykogen (et polysakkarid som svarer til stivelse).<br />

Glukagon virker modsat og aktiverer levercellerne til at omdanne sit depot af glykogen til glukose,<br />

når der mangler glukose i blodbanen. Foruden de to nævnte hormoner spiller hormonet adrenalin<br />

også en rolle i reguleringen af blodglukosen.<br />

Efter et måltid er koncentration af glukose i blodet høj<br />

<br />

hormonet insulin<br />

glukosen trækkes ind i muskelceller<br />

glukosen omdannes til glykogendepot i leveren<br />

Ved sult er koncentrationen af glukose i blodet lav<br />

<br />

hormonet glukagon<br />

Glykogen spaltes til glukose i levercellerne<br />

glukosen frigives til blodet<br />

30


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Diabetes mellitus (DM) er en fællesbetegnelse for flere forskellige stofskiftesygdomme, hvor<br />

omsætningen af blandt andet glukose ikke forløber, som den skal. Der skelnes mellem to typer af<br />

diabetes.<br />

Diabetes type-1, der kort fortalt skyldes manglende produktion af insulin i -cellerne og diabetes<br />

type-2, tidligere kendt som aldersdiabetes, der er en form for insulinresistens, som bevirker at<br />

cellerne ikke reagerer på hormonet insulin.<br />

Resultatet bliver i begge tilfældet at blodglukosen vil forblive meget høj efter et måltid, hvis ikke<br />

patienten behandles. På lang sigt udvikles en række følgesygdomme, her kan nævnes øget risiko<br />

for hjerte-karsygdom, blindhed, nyreproblemer og dårlig sårheling.<br />

Hvis en persons fasteblodglukose er over 7mmol/l eller hvis ikke-fastende blodglukose ligger over<br />

11,1mmol/l, har personen diabetes. Et normalt faste blodglukose ligger under 5mmol/l .<br />

Diabetes kan blandt andet konstateres ved at udføre en glukosebelastningstest.<br />

Flere oplysninger om diabetes finder du på hjemmesiden: www.diabetes.dk<br />

Tabel over glykæmisk indeks kan findes på:<br />

http://www.sundfo.dk/alt_om_ernaering/glykaemisk_indeks_tabel.htm<br />

Formål:<br />

At undersøge variationen i koncentrationen i blodglukoseniveauet efter indtagelse af forskellige<br />

kulhydrater.<br />

Materialer:<br />

bagevægt<br />

forskellige kulhydratrige fødevarer<br />

apparat til måling af blodglukose<br />

glukosticks<br />

spritservietter<br />

prikkepen<br />

tabel over det glykæmiske indeks (udleveres til øvelsen)<br />

Metode:<br />

Der vælges 2-3 forsøgs personer, som møder fastende dvs. ingen mad, drikke eller røg de sidste 2-<br />

3 timer. Personernes blodglukose måles inden forsøget starter. Personerne indtager nu hver en<br />

portion kulhydratholdigt føde svarende til 1 gram kulhydrat/ kg legemesvægt (beregnes vha.<br />

kosttabel) til maden indtages samme mængde vand 2dl.<br />

Forsøgspersonerne indtager nu den udvalgte fødevare og deres blodglukose måles med intervaller<br />

på 15-20 minutter i ca.90 minutter afhængig af om blodglukosen er<br />

faldet til normal<br />

niveau eller ej.<br />

31


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Forklar hvorfor kroppens celler har brug for glukose og gør rede for hvor og i hvilken form<br />

glukosen kan deponeres i kroppen. Gør rede for omsætningen /forbrændingen af glukosen i<br />

forbindelse med muskelarbejde. Forklar til sidst hvad det glykæmiske indeks er et udtryk for.<br />

Hypotese:<br />

Formuler dine forventninger til forsøget - hvordan forventer du blodglukosen vil stige ved<br />

indtagelse af de valgte næringsmidler?<br />

Materialer/metode:<br />

Tilføj hvis der er ændringer i forhold til øvelsesvejledningen<br />

Resultater:<br />

Lav et skema der viser forsøgspersonernes blodglukosekoncentrationer på måletidspunkterne.<br />

Tegn en kurve over forsøgsresultaterne der viser blodglukose koncentrationen, som funktion af<br />

tiden.<br />

Diskussion:<br />

1. Diskuter personernes blodglukosekoncentration inden forsøget starter. Forklar hvordan de<br />

forskellige forsøgsresultater ser ud og hvordan det passer med teorien om forskellige<br />

kulhydraters optagelse i blodet.<br />

2. Kan man se, at det glykæmiske indeks har betydning for blodsukkerstigningen i de tre forsøg?<br />

3. Hvilke kulhydrater er bedst at indtage, hvis man skal udføre et langvarigt fysisk arbejde?<br />

4. Hvordan kan blodsukkerniveauet opretholdes f.eks. under en løbetur?<br />

5. Analyser figurerne side 4 og forklar hvem af de to personer på figur 13 der har diabetes.<br />

Konklusion:<br />

Fejlkilder:<br />

32


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Figuren er hentet fra opgave 108, Biofag nr.9 1997 Særnummer/opgavesamling<br />

33


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Eksperiment nr.:<br />

Bestemmelse af egen blodtype<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

34


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Bestemmelse af egen blodtype.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundsstof:<br />

Et-gens nedarvning (Mendels 1.lov), AB0- blodtypesystemet, Rhesus-blodtypesystemet,<br />

antigener og antistoffer (immunsystemet).<br />

Teori:<br />

De to mest kendte blodtypesystemer er AB0-systemet og Rhesus-systemet. Kendskabet til en<br />

persons blodtype er vigtig i forbindelse med blodtransfusioner, organtransplantation og har<br />

tidligere været den mest anvendte metode i forbindelse med faderskabssager. Endvidere er<br />

blodtypernes genetik et godt eksempel på, hvordan egenskaber nedarves.<br />

ABO-blodtypesystemet:<br />

Inden for AB0-blodtypesystemet kan man have blodtype A, B, AB, eller 0(nul).<br />

Hvilken blodtype man har inden for AB0-systemet, bestemmes af 3 gener, der er multiple alleler.<br />

Allelerne i ABO systemet betegnes I A og I B og i.<br />

I A og I B er indbyrdes codominante, men dominerer begge over genet i, der er recessivt.<br />

Genet I står for evnen til at danne et antigen på overfladen af de røde blodceller, hvorimod genet i<br />

ikke kan danne antigener. Hos personer med genet I kan der enten dannes antigen A eller antigen<br />

B, derfor opskrives allelerne som I A eller I B .<br />

Da en persons genotype altid består af to allele gener, som man har fået fra sin mor og sin far, har<br />

man kun to af de mulige alleler i sin genotype.<br />

Blodtype = fænotype Genotype Antigen på de<br />

Antistof i serum<br />

røde blodlegemer<br />

A I A I A eller I A i antigen A anti-B<br />

B I B I B eller I B i antigen B anti-A<br />

AB I A I B antigen A og antigen B Intet<br />

0 ii ingen anti-A og anti-B<br />

Rhesus positiv DD eller Dd antigen D ingen<br />

Rhesus negativ dd ingen der kan dannes anti-D<br />

Rhesus-blodtypesystemet:<br />

Inden for dette system kan man være enten Rhesus positiv ( Rh + ) eller Rhesus negativ (Rh - ).<br />

Personer der er Rhesuspositive har et specielt antigen på deres røde blodlegemer, mens personer<br />

der er Rhesusnegative mangler dette antigen.<br />

Rhesus blodtypen styres af 2 allele gener. Det dominante gen D medfører dannelse af Rhesus<br />

antigenet hvor det recessive gen d ikke fører til antigen dannelse.<br />

35


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Antigener og antistoffer:<br />

Antigen, stof eller organisme, som fremkalder en antistofreaktion i kroppen. Antigener er ofte<br />

fremmede proteiner, men alle fremmede stoffer kan i princippet virke som mulige antigener.<br />

Antigenerne i ABO-systemet er såkaldte glykoproteiner.<br />

Du kan læse mere om dannelsen af ABO-systemets antigener i Genetikbogen, Nucleus side 51-52.<br />

Antistof, proteiner som dannes af immunforsvarets celler, og som binder sig til indtrængende<br />

fremmedstoffer (antigener). Antistof-antigenkomplekset optages af de såkaldte makrofager.<br />

Blodtypernes antigen- antistofreaktioner:<br />

Ud fra ovenstående definition af antigener og antistoffer, vil vi nu se på antigenantistofreaktionerne<br />

i de to blodtypesystemer. Princippet er at der mod et givet antigen X kan<br />

dannes et antistof anti-X, der kan binde sig til antigenet og uskadeliggøre dette.<br />

I ABO-systemet findes der to forskellige antigener, antigen A og antigen B. Det antistof der dannes<br />

mod antigen A, kaldes anti-A og det antistof der dannes mod antigen B kaldes anti-B. Når<br />

antistoffet bindes til det antigen det passer til, vil der ske en sammenklumpning af de røde<br />

blodlegemer. I praksis betyder dette, at hvis man giver en person med blodtype 0 en<br />

blodtransfusion med blod fra en person med blodtype A, vil personens blod begynde at klumpe<br />

(agglutinere), hvilket i værste fald kan være dødeligt.<br />

Et særligt forhold gør sig gældende, når man taler om antistofferne i ABO-systemet, nemlig det at<br />

kroppen danner disse antistoffer i løbet af det første leveår, selvom der tilsyneladende ikke er<br />

behov for dem. I Rhesussystemet forholder det sig til gengæld sådan, at der først dannes<br />

antistoffer, hvis kroppen præsenteres for det fremmede antigen, i dette tilfælde antigen D. Rhesus<br />

negative personer har således ikke "automatisk" antistof imod Rhesus positivt blod.<br />

Prøv at gå ind i tabellen ovenfor og efterprøv teorien om forligelige og uforligelige blodtyper.<br />

Formål:<br />

Formålet med dette forsøg er at bestemme egen blodtype og se eksempler på hvordan bindingen<br />

mellem antigener og antistoffer kan få blodet til at klumpe sammen.<br />

Materialer:<br />

Eldonkort til bestemmelse af blodtype.<br />

En spritserviet<br />

En prikkepen til at fremskaffe en dråbe blod.<br />

4 rørepinde<br />

Et bægerglas med vand<br />

En dråbepipette<br />

36


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

På Eldonkortet er der 4 felter:<br />

Et felt med antistof A (anti-A)<br />

Et felt med antistof B (anti-B)<br />

Et felt med antistof D (anti-D)<br />

Et kontrolfelt uden antistof<br />

Metode:<br />

Et Eldonkort udpakkes<br />

Tilsæt én dråbe vand med pipetten til hvert felt<br />

Rør med rørepinden til feltets antistof (farven) er opløst<br />

Vask hænderne og afsprit den finger, du skal prikkes i<br />

Klem en lille dråbe blod ud i hvert felt på kortet, uden at berøre det<br />

Tag en rørepind - en til hvert felt - og spred bloddråben ud i hele feltet<br />

Vip med kortet så prøven holdes i bevægelse<br />

Resultatet kan aflæses efter 5-10 minutter<br />

Aflæs nu hvilken blodtype du har.<br />

NB: Alt affald samles i en speciel plastikpose og destrueres!<br />

37


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Undersøg ved hjælp af opslag, hvordan de forskellige blodtyper er fordelt i Danmark.<br />

Forklar hvorfor der kan opstå komplikationer under graviditeten, hvis en vordende mor er Rhesus<br />

negativ og venter et Rhesuspositivt barn.<br />

Materialer/metode: Skriv kun hvis der er sket ændringer i forhold til øvelsesvejledningen.<br />

Resultater:<br />

Tegn Eldonkortet med dets fire felter og tegn de felter, hvor blodet klumper sammen<br />

(agglutinerer).<br />

Ved hjælp af de to første felter kan du aflæse hvilken blodtype du har I ABO-systemet. I det tredje<br />

felt kan du aflæse din blodtype med hensyn til rhesusfaktoren. Du skal bruge din viden om, hvilke<br />

antigener, der binder til de antistoffer, der er på kortet.<br />

Diskussion:<br />

1. Undersøg ved hjælp af opslag, hvordan de forskellige blodtyper er fordelt i Danmark<br />

2. I øvelsen har du bestemt din blodtype. Forklar hvilken reaktion, der er sket på kortet.<br />

3. Hvorfor er det vigtigt ved blodtransfusioner, at modtageren og donorens blod er af samme<br />

type?<br />

4. Hvorfor kan man sige, at en person med blodtypen AB er universalmodtager?<br />

5. Hvorfor er en person med blodtype 0 universaldonor?<br />

6. Hvorfra kan man skaffe sig de antistoffer, som er påsat Eldonkortet?<br />

7. Forklar hvorfor et forældrepar der begge er rhesuspositive godt kan få et barn der er<br />

rhesusnegativt.<br />

8. Følgende aktuelle faderskabssag skal opklares:<br />

Moderens blodtype: A, Rh-<br />

Barnets blodtype: B, Rh+<br />

Mulige fædre:<br />

far nr.1: 0, Rh+<br />

far nr.2: B, Rh+<br />

far nr.3: AB, Rhfar<br />

nr.4: A, Rh+<br />

38


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

ELISA- test - Påvisning af "Kyssesyge"<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

39


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Øvelsevejledning: ELISA- test - Påvisning af "Kyssesyge".<br />

Relevant baggrundstof:<br />

Kendskab til immunforsvaret, antigener og antistoffer, mikroorganismernes opbygning (bakterier<br />

og virus).<br />

Teori:<br />

Har man mistanke om at en person er smittet med en infektionssygdom f.eks. mononukleose<br />

(kyssesyge), borrelia-bakterien (bid fra Skovflåt) eller HIV-virus, kan man benytte en antistoftest<br />

kaldet ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay).<br />

ELISA-testen bruges til at undersøge om en person har dannet antistoffer mod et bestemt antigen.<br />

Et antistof kan binde sig til et specifikt antigen, denne egenskab benyttes til at påvise om en<br />

person indeholder et specifikt antigen eller et specifikt antistof. En negativ test viser, at personen<br />

ikke har dannet antistoffer mod den pågældende virus eller bakterie. En positiv test viser, at<br />

personen har dannet antistof i kroppen.<br />

Antistofferne kan inddeles i 5 forskellige klasser. To af disse er særlig interessante IgM, som<br />

optræder ved førstegangsinfektioner og IgG, der er en del af den immunologiske hukommelse.<br />

Man kan designe sin ELISA test, så der testes for både IgM og IgG. På denne måde er det muligt at<br />

afgøre om der er tale om en ny infektion eller personen er blevet smittet for længe siden.<br />

Antigener er stoffer eller organisme, som fremkalder en antistofreaktion i kroppen.<br />

Antigener er ofte fremmede proteiner, men alle fremmede stoffer kan i princippet virke<br />

som mulige antigener.<br />

Antistoffer er proteiner, som dannes af immunforsvarets celler, og deres opgave er at<br />

binde sig til indtrængende fremmedstoffer (antigener). Antistof-antigenkomplekset<br />

optages af de såkaldte makrofager.<br />

Mononukleose (kyssesyge):<br />

Infektiøs mononukleose, eller "kyssesyge", skyldes en virus ved navn Epstein-Barr virus (EBV). Det<br />

er en DNA virus som hører til gruppen af "Herpes vira", men den har intet at gøre med<br />

forkølelsessår eller genital herpes.<br />

Infektionen kaldes kyssesyge, fordi smitten overføres via inficeret spyt. Det kan ske enten ved kys<br />

eller ved luftbåren smitte. Som det gælder for andre herpesvirusinfektioner forbliver virus i<br />

kroppen resten af livet, selvom man sandsynligvis kun vil få mononukleose én gang i livet. Virus<br />

kan formentlig med mellemrum findes i spyttet og sprede smitte denne vej.<br />

Sygdommen rammer specielt 15 til 25-årige og giver influenzalignende symptomer med<br />

halsbetændelse og hævelse af lymfeknuder og milt. Sygdommen er hyppigt forekommende;<br />

mellem 80 og 90 % af voksenbefolkningen har haft sygdommen.<br />

Sygdommen er i langt de fleste tilfælde ufarlig og uden senere komplikationer. Eventuelle<br />

komplikationer til mononukleose kan være forstørret milt, forstørret lever og en udpræget<br />

træthed. I sådanne tilfælde anbefaler man, at patienten undgår hårdt fysisk arbejde og sport med<br />

kropskontakt til ca. 4 uger efter sygdomsophør, da der kan ske skader på milten. Indtagelse af<br />

40


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

alkohol bør undlades i op til et halvt år på grund af sygdommens påvirkning af leveren.<br />

Diagnosen for mononukleose stilles ud fra de ovennævnte symptomer og sygdommens udvikling.<br />

Desuden kan lægen supplere med en podning fra halsen eller en blodprøve for påvisning af akut<br />

Epstein-Barr virus infektion (Monospot test) eller påvisning af antistoffer tydende på en tidligere<br />

infektion.<br />

Der findes ingen behandling rettet direkte mod Epstein-Barr virus. Behandlingen er derfor rettet<br />

mod sygdommens symptomer.<br />

Udover ovennævnte kendes en række andre sygdomme, som virus sættes i forbindelse med. Her<br />

kan nævnes Burkitt's lymphoma (en form for lymfekræft), kræft i næse/svælg, AIDS,<br />

autoimmunsygdomme og kronisk træthedssyndrom.<br />

Formål:<br />

Ved hjælp af ELISA-testen skal vi teste fire "hypotetiske" patienter, for mononukleose. Dette gøres<br />

ved at undersøge om patienternes "serum" indeholder immunoglobuliner af typen IgG rettet mod<br />

Eppstein-Barr virus (antigener).<br />

Serum= blodplasma, hvor størkningsfaktorerne er fjernet.<br />

Princippet bag fremstilling af ELISA-testen:<br />

ELISA testen udføres på en plastikplade med en række små brønde. Princippet er, at man<br />

fastklæber antigener fra EBV-virus på brøndens bund og sider. Herefter tilsættes serum med<br />

eventuelle antistoffer (IgG) fra patienten. Disse antistoffer vil binde til antigenerne.<br />

For at påvise antigen-antistof komplekset tilsættes endnu et antistof. Dette antistof binder til IgG<br />

som, når det bindes, aktiverer et enzym. Det aktive enzym kan påvises ved at tilsætte et specielt<br />

substrat, som ved reaktion udløser en kraftig farvereaktion.<br />

Materialer til forsøget.<br />

Varmeskab til inkubering af prøver ved 37 ° C<br />

En plastplade med 8 brønde<br />

En automatpipette/mikropipette 0-50 µL og 0-250µL<br />

Spidser til pipette<br />

Bæger til affald<br />

Bægerglas til brugte spidser<br />

Bægerglas med 10 mL fosfatbufferopløsning (PBS)<br />

8 Eppendorf rør med prøverne A-H :<br />

41


VUC Århus<br />

Oversigt over indholdet i prøverne A-H:<br />

Lab.B11<br />

Rør Indhold Mærket som Kommentar<br />

A 0,5mL EBV antigener EBV<br />

B 75µL Positiv kontrol + Indeholder IgG<br />

C 75µL Donor 1 serum DS1 Serum fra patient<br />

D 75µL Donor 2 serum DS2 Serum fra patient<br />

E 75µL Donor 3 serum DS3 Serum fra patient<br />

F 75µL Donor 4 serum DS4 Serum fra patient<br />

G+PBS 0,5mL Sekundær antistof 2'anti Antistof mod IgG +enzym<br />

H 0,4mL Substrat substrat Substrat til reaktion med enzym<br />

* Til læreren: opløsningerne A-F kan laves i forvejen.<br />

Metode:<br />

Udførsel af testen trin for trin.<br />

OBS DET ER VIGTIGT AT BRUGE RENE SPIDSER HVER GANG.<br />

Påsætning af antigener.<br />

1. Start med at mærke brøndene 1-6 (2 brønde er i overskud)<br />

2. Tilsæt 50µL EBV fra rør A til hver af brøndene 1-6 og inkuber ved stuetemperatur i 5<br />

minutter.<br />

3. Sug forsigtigt væsken op af brøndene (går til affald).<br />

4. Vask hver brønd en gang med PBS (fosfatbuffer opløsning). Dette gøres ved, forsigtigt, at<br />

fylde 250µL PBS i brønden. Fjern herefter væsken og smid den ud (affald). Undgå at spilde<br />

i brønden ved siden af.<br />

Påsætning af prøver.<br />

Tilsæt nu følgende til brøndene 1-6 HUSK AT SKIFTE SPIDSER.<br />

brønd 1. 50 µL PBS<br />

brønd 2. 50 µL fra rør B<br />

brønd 3. 50 µL fra rør C<br />

brønd 4. 50 µL fra rør D<br />

brønd 5. 50 µL fra rør E<br />

brønd 6. 50 µL fra rørF<br />

(fosfatbuffer opløsning/neg.kontrol)<br />

+ (+ positiv kontrol)<br />

DS1<br />

DS2<br />

DS3<br />

DS4<br />

42


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

Inkubering af prøverne.<br />

• Prøverne sættes i varmeskab til inkubering ved 37 ° C i 15 minutter.<br />

• Efter inkubering fjernes væsken forsigtigt fra brøndene (HUSK ny spidser)<br />

• Hver brønd vaskes med 250 µL PBS- se under punkt 4 (under påsætning af antigener)<br />

Tilsætning af sekundær antistof.<br />

• Tilsæt nu 50 µL "2'anti" til alle 6 brønde<br />

• inkuber prøverne ved 37 ° C i 15 minutter.<br />

• Efter inkubering fjernes væsken fra hver brønd med hver sin spids (affald)<br />

• Hver brønd vaskes med 250 µL PBS- se under punkt 4 (under påsætning af antigener)<br />

.<br />

Tilsætning af substrat.<br />

• Tilsæt 50 µL "substrat" til alle 6 brønde<br />

• Inkuber prøverne ved 37 ° C i 5 minutter.<br />

• Analyser prøverne ved at iagttage farvereaktion efter ca. 5 minutter.<br />

Kommentar til reaktionen mellem de sekundære antistoffer/ enzym og substratet.<br />

De sekundære antistoffer (2'anti), som bruges i reaktion er fremstillet ved immunisering med<br />

human IgG i kanin eller ged. Efter oprensning kobles enzymet peroxidase på anti-IgG (2'anti).<br />

Peroxidase omdanner brintoverilte 2 H 2 O 2 → 2H 2 O + O 2<br />

Peroxidase er et enzym med en meget høj katalytisk aktivitet, idet det kan omdanne 10 6 molekyler<br />

per sekund.<br />

Substratet som tilsættes prøven består af H 2 O 2 og et stof kaldet ABTS, som har den egenskab, at<br />

det i oxyderet tilstand bliver grønt.<br />

Når substratet tilsættes begynder peroxidasen straks at nedbryde H 2 O 2 og der dannes herved O 2<br />

som kan oxydere ABTS. ABTS bliver herved grøn.<br />

ABTS : azino-diethylbenzthiazoline sulfonate.<br />

43


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

1. Beskriv funktionen af de forskellige celler i immunforsvaret.<br />

2. Gør rede for hvordan immunforsvarets hukommelse virker.<br />

3. Gør rede for hvordan et antistof er opbygget<br />

Materialer/metode: Skriv kun hvis der er ændringer til øvelsesvejledningen<br />

Resultat:<br />

Tag et foto af jeres resultater og gør rede for hvilke patienter, der er smittet med mononukleose.<br />

Diskussion:<br />

1. Forklar, princippet bag den reaktion man ser, når resultatet af testen er positiv.<br />

2. Forklar, hvorfor kontrolforsøget i brønd 2 giver positivreaktion.<br />

3. Forklar, hvorfor man har et kontrolforsøg, hvor der kun tilsættes PBS.<br />

4. Når man udfører ELISA testen i praksis testes der både for IgM og IgG. Endvidere<br />

bestemmer man hvor kraftig farven er. Jo kraftigere farven er, des flere antistoffer har<br />

testpersonen i sit blod.<br />

Forklar hvordan disse oplysninger kan være med til at klarlægge sygdomsforløbet.<br />

5. Giv eksempler på hvordan smitte generelt kan overføres fra person til person.<br />

6. Hvorfor kan vi kun i nogen tilfælde vaccinere effektivt mod virus infektioner?<br />

Fejlkilder: Angiv hvilke fejlkilder der er i forsøget.<br />

Konklusion:<br />

44


VUC Århus<br />

Eksperiment nr.:<br />

Lab.B11<br />

Mitosen - den almindelige celledeling<br />

Rapporten er udført af:<br />

I samarbejde med:<br />

Dato:<br />

Rettet af:<br />

45


VUC Århus<br />

Øvelsesvejledning: Mitosen - den almindelige celledeling.<br />

Lab.B11<br />

Relevant baggrundstof:<br />

Cellens opbygning, cellens cyklus, den almindelige celledeling - mitosen, de genetiske<br />

grundbegreber som: gener, alleler, kromatider og kromosomer.<br />

Teori:<br />

Der er to former for celledeling, den almindelige celledeling (mitosen) og den celledeling der fører<br />

til dannelsen af kønsceller (meiosen). I denne øvelse skal vi beskæftige os med mitosen.<br />

Formålet med mitosen er at skabe nye celler, som er identiske med den oprindelige celle. Denne<br />

form<br />

for celledeling sker i organismen, når den vokser eller i forbindelse med udskiftning af slidte celler.<br />

Inden celledelingen kopieres cellens arvemateriale, DNA, det betyder at kromosomerne nu findes i<br />

en struktur, som består af to ens DNA strenge også kaldet kromatider. Kromatiderne holdes<br />

sammen ved hjælp af et såkaldt centromer.<br />

Under celledelingen adskilles kromatiderne og føres til hver sin ende i cellens cytoplasma (cellens<br />

pol), herefter deles cellens cytoplasma og der dannes ny membran omkring de to nye celler.<br />

Celledelingen består således af tre vigtige trin:<br />

• Kopiering af arvematerialet (DNA)<br />

• Adskillelse af de to kopier (kromatiderne)<br />

• Deling af cellens cytoplasma<br />

Formål:<br />

I denne øvelse skal man ved hjælp af mikroskopet se og identificere de forskellige faser i mitosen.<br />

Der fremstilles et mitose præparat af løgceller i deling eller der kan bruges faste<br />

mitosepræparater.<br />

Anvend figuren side 3<br />

Materialer:<br />

Rødder fra rødløg eller hyacinter i god vækst<br />

Objektglas, dækglas<br />

1% orcein i 45% eddikesyre (færdiglavet)<br />

Spritbrænder<br />

Præparernål<br />

Filterpapir<br />

Mikroskop<br />

Metode:<br />

Det er muligt selv at fremstille et mitose præparatet. Dette gøres ved at tage en rodspids i vækst<br />

f.eks. fra løg, bønnespirer eller hyacinter. Den yderste spids er rodens vækstzone og her vil der<br />

hele tiden være celler i deling fordi roden vokser. Ved at farve rodspidsen med orcein kan man<br />

farve cellens DNA og cellens kromosomer bliver på denne måde synlige i mikroskopet.<br />

Fremstilling af mitosepræparat:<br />

46


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

1. Der skæres 1-2 mm af rodspidsen - en rodspids i god vækst kendes på, at den har en mælket<br />

zone.<br />

2. Rodspidsen overføres til et objektglas med en dråbe orcein (1% i 45% eddikesyre) og findeles<br />

med en præparernål. Herefter lægges et dækglas på så farven ikke fordamper.<br />

3. Præparatet opvarmes til ca. 60°C over en spritflamme (det må ikke koge). Ved opvarmningen<br />

bliver cellerne bløde og midtlamellen opløses.<br />

4. Læg nu et stykke filterpapir stramt ud over glasset og bank forsigtigt på dækglasset med enden<br />

af præparernålen. Efterfulgt af et kraftigt tryk med tommelfingeren. På denne måde opnår<br />

man at sprede cellerne.<br />

5. Cellerne er nu klar til mikroskopet.<br />

Brug af mikroskopet:<br />

Husk altid at stille skarpt inden der skiftes forstørrelse ellers ødelægger man præparatet og<br />

mikroskopet.<br />

1. Fastgør præparatet i klemmen på mikroskopets bord.<br />

2. Vælg den forstørrelsen/objektivet mærket 4x (dette svarer til en forstørrelse på 40x)<br />

47


VUC Århus<br />

Lab.B11<br />

3. Søg rundt i præparatet og konstater at cellerne har forskelligt udseende. Det er<br />

cellekernens indhold der er stærkt farvet Læg mærke til den tydelige celleafgrænsning som<br />

er cellevæggen.<br />

4. Find dernæst de faser som ser interessante ud.<br />

5. Læg den valgte celle i centrum af synsfeltet.<br />

6. Stil skarpt.<br />

7. Skift herefter til den næste forstørrelse (10x) herefter kan man skifte til (60x)<br />

Iagttag og tegn:<br />

Læg det færdige præparat under mikroskopet og find så mange forskellige faser i mitosen som<br />

muligt.<br />

Faserne tegnes og navngives. Prøv at beskriv fasen så nøjagtig som muligt ved at bruge<br />

betegnelser som tidlig metafase, sen osv. Prøv også at iagttage om cellen ses fra polen eller ind fra<br />

siden.<br />

48


VUC Århus<br />

Rapportvejledning:<br />

Lab.B11<br />

Teori:<br />

Beskriv kort cellens livscyklus<br />

Gør rede for kromosomernes opbygning.<br />

Forklar hvordan DNA kopierer sig selv inden celledeling (replikation)<br />

Materiale/metode: Skriv kun hvis der er ændringer i forhold til vejledningen.<br />

Resultater: Vedlæg dine tegninger af de forskellige faser i celledelingen.<br />

Diskussion:<br />

Rapporten skal indeholde en besvarelsen af de følgende spørgsmål.<br />

I de følgende spørgsmål er der kun et rigtigt svar pr. spørgsmål:<br />

1. Resultatet af en mitotisk celledeling er……..<br />

a. 4 genetisk helt identiske celler.<br />

b. 2 kønsceller, der hver for sig er genetisk forskellige.<br />

c. 2 genetisk helt identiske celler.<br />

d. 4 genetisk forskellige kønsceller.<br />

2. Mitosens funktion er at……<br />

a. give genetisk information uforandret videre.<br />

b. sørge for, at individer af samme art ikke bliver genetisk forskellige.<br />

c. overflødiggøre kønnet formering.<br />

d. sørge for, at individer af forskellig art ikke kan få afkom sammen.<br />

3. Hvad er et kromosom?<br />

a. En gruppe gener ordnet efter størrelse.<br />

b. En struktur, der findes i cellekernen og som er opbygget af DNA.<br />

c. Et stykke DNA, der koder for et bestemt protein.<br />

d. En struktur i cellernes cytoplasma, hvor m-RNA aflæses og proteinerne dannes.<br />

4. Hvad er et gen?<br />

a. Et stykke DNA, der koder for et bestemt artsspecifikt kulhydrat.<br />

b. Et overfladeprotein på en bakterie, en viruspartikel eller en svampecelle.<br />

c. Et stykke DNA, der koder for ét bestemt protein.<br />

d. Det modsatte af et antigen.<br />

5. Allele gener er …..<br />

a. alle de gener, der tilsammen styrer en bestemt egenskab.<br />

b. alle generne på et givet kromosom.<br />

c. gener, der er placeret samme sted på to homologe kromosomer og som styrer<br />

den samme egenskab.<br />

d. to ens gener, der gør deres bærer homozygotisk.<br />

På nedenstående fotos ses forskellige faser i mitosen, som de ser ud i mikroskopet.<br />

49


VUC Århus<br />

Se godt på billederne og sæt kryds ud for de korrekte udsagn - der må sættes flere krydser.<br />

Lab.B11<br />

Mellem to celledelinger befinder cellen sig i interfasen.<br />

I interfasen - sker en fordobling af DNA <br />

- kan man tydeligt se kromosomerne <br />

- arbejder cellen <br />

- forsvinder kernemembranen <br />

Første fase i mitosen kaldes profasen.<br />

I profasen - opløses kernemembranen <br />

- er kromosomerne fordoblede <br />

- vokser cellen <br />

Metafasen kaldes også midtfasen.<br />

I metafasen - kan man tydeligt se kromosomerne <br />

- dannes der tentråde <br />

- kan man se tentrådene <br />

- ligger kromosomerne i ækvatorplanet <br />

- mangler cellemembranen <br />

Anafasen er den smukkeste fase i mitosen.<br />

I anafasen - adskilles kromatiderne <br />

- gendannes kernemembranen <br />

-<br />

- kromatiderne føres mod cellens poler <br />

- består kromosomet af en DNA-streng <br />

Telofasen er den sidste fase i mitosen.<br />

I telofasen - deles cellens cytoplasma <br />

- gendannes kernemembranen <br />

- kan man stadig se kromosomerne <br />

- er cellen blevet dobbelt så stor <br />

- dannes der ny cellemembran <br />

50

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!