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JAMSTEC Rep. Res. Dev., Volume 14, March 2012, 17 _ 25<br />

― 原 著 論 文 ―<br />

ニスキン 採 水 器 内 部 のニトリルゴム 製 O リングによる 一 次 生 産 阻 害<br />

松 本 和 彦<br />

1*<br />

, 藤 木 徹 一 1<br />

, 本 多 牧 生 1<br />

, 脇 田 昌 英 2<br />

, 川 上 創 2<br />

, 喜 多 村 稔 3<br />

, 才 野 敏 郎<br />

1<br />

海 洋 地 球 研 究 船 「みらい」では, 採 水 にニスキン-X 採 水 器 を 取 り 付 けたCTD 採 水 システムを 使 用 している.ニス<br />

キン-X 採 水 器 は 蓋 閉 用 のスプリングが 採 水 器 外 側 に 配 置 され,ボトル 内 部 へのゴムや 微 量 金 属 による 汚 染 を 極 力 排 除<br />

できる 仕 組 みとなっている. 通 常 , 一 次 生 産 量 測 定 用 のサンプリングには 海 水 サンプルへの 微 量 金 属 等 の 汚 染 防 止 を 徹<br />

底 するため, 内 部 にテフロンコーティングを 施 し,ボトル 内 部 及 び 部 品 各 種 を 酸 洗 浄 した 採 水 器 をクリーンニスキンと<br />

して 使 用 している.クリーンニスキンとその 他 のノーマルニスキンで 採 水 した 場 合 に, 実 際 に 一 次 生 産 量 に 差 が 生 じる<br />

のかを 確 かめたところ,ノーマルニスキンで 採 水 した 場 合 に 一 次 生 産 量 測 定 値 が 激 しく 低 下 した.その 差 を 生 じる 原 因<br />

を 把 握 するための 追 加 実 験 を 行 うと,ノーマルニスキンで 使 用 しているニトリルゴム 製 Oリングが 一 次 生 産 を 阻 害 して<br />

いることが 明 らかとなった.<br />

キーワード: 一 次 生 産 ,ニスキン 採 水 器 ,Oリング,ゴム 毒 性 ,ニトリルゴム,バイトンゴム<br />

2011 年 6 月 27 日 受 領 ;2011 年 11 月 7 日 受 理<br />

1 独 立 行 政 法 人 海 洋 研 究 開 発 機 構 地 球 環 境 変 動 領 域<br />

2 独 立 行 政 法 人 海 洋 研 究 開 発 機 構 むつ 研 究 所<br />

3 独 立 行 政 法 人 海 洋 研 究 開 発 機 構 海 洋 ・ 極 限 環 境 生 物 圏 領 域<br />

* 代 表 執 筆 者 :<br />

松 本 和 彦<br />

独 立 行 政 法 人 海 洋 研 究 開 発 機 構 地 球 環 境 変 動 領 域<br />

〒237-0061 神 奈 川 県 横 須 賀 市 夏 島 町 2-15<br />

046-867-9496<br />

matsumotok@jamstec.go.jp<br />

著 作 権 : 独 立 行 政 法 人 海 洋 研 究 開 発 機 構<br />

17


ニスキン 採 水 器 による 一 次 生 産 阻 害<br />

Inhibition of primary production by Niskin sampler<br />

― Original Paper ―<br />

Inhibition of primary production by nitrile rubber O-rings in Niskin sampler<br />

Kazuhiko Matsumoto 1* , Tetsuichi Fujiki 1 , Makio C. Honda 1 , Masahide Wakita 2 ,<br />

Hajime Kawakami 2 , Minoru Kitamura 3 , and Toshiro Saino 1<br />

Seawater sampling was conducted by a CTD system attached with Niskin-X sampler in the R/V Mirai. Niskin-X sampler<br />

can eliminate the contamination of toxic rubber and trace metal in the bottle as much as possible, because its closure spring is arranged<br />

outside of the bottle. Teflon-coated and acid-cleaned samplers of them were usually used for the sampling of primary production as<br />

“clean” Niskin. We tested the difference of primary production between “clean” and other “normal” Niskin sampling. Primary<br />

production estimated from “normal” Niskin sampling was decreased drastically than “clean” Niskin sampling. We tested again to<br />

evaluate the cause of such difference, and it was revealed that the using of nitrile rubber O-rings in the “normal” Niskin sampler<br />

inhibited primary production.<br />

Keywords: Primary production, Niskin sampler, O-ring, toxic rubber, nitrile rubber, Viton rubber<br />

Received 27 June 2011 ; Accepted 7 November 2011<br />

1 Research Institute for Global Change (RIGC), Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology (JAMSTEC)<br />

2 Mutsu Institute for Oceanography, Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology (JAMSTEC)<br />

3 Institute of Biogeosciences (Biogeos), Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology (JAMSTEC)<br />

*Corresponding author:<br />

Kazuhiko Matsumoto<br />

Research Institute for Global Change (RIGC), Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology (JAMSTEC)<br />

2-15 Natsushima-cho, Yokosuka 237-0061, Japan<br />

Tel. +81-46-867-9496<br />

matsumotok@jamstec.go.jp<br />

Copyright by Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology<br />

18 JAMSTEC Rep. Res. Dev., Volume 14, March 2012, 17 _ 25


K. Matsumoto et al.,<br />

1. はじめに<br />

植 物 プランクトンの 光 合 成 による 一 次 生 産 は 海 洋 物 質<br />

循 環 の 出 発 点 であり,その 海 洋 一 次 生 産 量 を 精 度 良 く 見<br />

積 もることが 物 質 循 環 研 究 においては 要 求 される. 一 般<br />

的 には, 海 洋 一 次 生 産 量 は 植 物 プランクトンを 現 場 海 水<br />

で 数 時 間 から24 時 間 培 養 し, 単 位 時 間 当 たりの 炭 素 取 り<br />

込 み 量 もしくは 酸 素 発 生 量 を 見 積 もることで 求 められる.<br />

しかし, 培 養 法 による 一 次 生 産 量 の 算 出 に 際 しては,そ<br />

のサンプリング 方 法 に 注 意 しなければならないことが 以<br />

前 より 指 摘 されている(Karl and Dore, 2001).これまでに<br />

も,サンプリング 時 に 銅 や 亜 鉛 ,カドミウム 等 の 微 量 金<br />

属 の 汚 染 によって 一 次 生 産 が 阻 害 されることが 報 告 され<br />

ている(Fitzwater et al.,1982; Brand et al.,1986).この 影 響 は<br />

微 量 金 属 の 少 ない 外 洋 域 表 層 ではより 深 刻 なものになる<br />

と 考 えられる. 一 方 で,いくつかの 微 量 金 属 は 植 物 プラ<br />

ンクトンにとっては 必 要 な 栄 養 塩 でもあり, 特 に 鉄 はわ<br />

ずかな 量 の 添 加 でも 植 物 プランクトンの 現 存 量 や 一 次 生<br />

産 量 を 増 加 させる 効 果 があることが, 多 くの 知 見 で 示 さ<br />

れている(Martin and Fitzwater 1988; Takeda and Obata 1995;<br />

Fitzwater et al.,1996).さらに,ラテックスゴムやタイゴン<br />

チューブが 植 物 プランクトンや 動 物 プランクトン,バク<br />

テリア 等 の 海 洋 微 生 物 に 対 して 毒 性 を 示 すことが 指 摘 さ<br />

れており(Price et al.,1986), 採 水 器 内 部 で 使 用 されている<br />

ゴムチューブは 一 次 生 産 に 深 刻 な 阻 害 的 影 響 を 及 ぼすこ<br />

とが 報 告 されている(Williams and Robertson, 1989).<br />

このような 問 題 を 改 善 するため,クリーンテクニック<br />

と 呼 ばれる 極 力 微 量 金 属 の 汚 染 を 避 ける 処 置 を 行 った 上<br />

で, 採 水 器 内 にゴムや 金 属 のスプリングを 通 さず,テフ<br />

ロンコーティングを 施 し, 表 面 水 からの 汚 染 も 防 げる 構<br />

造 になっているGo-Flo 採 水 器 を 用 いて 一 次 生 産 測 定 を 行<br />

う こ と が 推 奨 さ れ て い る(Fitzwater et al.,1982; Karl and<br />

Dore, 2001). 近 年 では,スプリングを 採 水 器 の 外 に 配 し<br />

た 改 良 型 のニスキン 採 水 器 としてニスキン-X 採 水 器 も<br />

開 発 され, 海 洋 地 球 研 究 船 「みらい」では,12リットル<br />

のニスキン-X 採 水 器 を36 本 取 り 付 けたCTD 採 水 システ<br />

ムによる 採 水 が 行 われている.このうち,14 本 のニスキ<br />

ン-X 採 水 器 については 内 部 にテフロンコーティングが<br />

施 され, 観 測 前 に 酸 洗 浄 を 行 って 一 次 生 産 測 定 用 サンプ<br />

ルの 採 水 に 用 いている. 本 研 究 では, 採 水 器 の 違 いが 一<br />

次 生 産 測 定 に 影 響 を 及 ぼすのか, 及 ぼすとすれば 要 因 は<br />

何 か 評 価 することを 試 みた.<br />

2. 実 験 方 法<br />

2.1. ニスキンボトル 洗 浄 処 理<br />

「みらい」に 搭 載 されているニスキン-X 採 水 器 (Fig. 1)<br />

Air vent<br />

O-ring<br />

Petcock<br />

Fig. 1. Niskin-X sampler .<br />

図 1. ニスキン-X 採 水 器 .<br />

JAMSTEC Rep. Res. Dev., Volume 14, March 2012, 17 _ 25<br />

19


ニスキン 採 水 器 による 一 次 生 産 阻 害<br />

Inhibition of primary production by Niskin sampler<br />

には 内 部 がテフロンコーティングされていないもの( 以<br />

下 ,ノーマルニスキン)と,テフロンコーティングされ<br />

ているもの( 以 下 ,クリーンニスキン)の 二 種 類 がある.<br />

両 者 の 構 造 は,テフロンコーティング 以 外 は 基 本 的 には<br />

同 一 の 仕 様 であるが,Oリングの 材 質 , 洗 浄 方 法 等 の 運<br />

用 面 で 異 なる 点 がある(Table 1). 本 実 験 では, 観 測 航 海<br />

開 始 前 に 行 うニスキンボトル 内 部 の 酸 洗 浄 については 両<br />

者 ともに 実 施 しているが,ノーマルニスキンについては<br />

内 部 の 器 具 接 合 面 の 樹 脂 がむき 出 しであることを 考 慮 し,<br />

クリーンニスキンに 比 べて 弱 い0.1Nの 塩 酸 での 浸 漬 洗 浄<br />

を 行 っている.なお, 採 水 観 測 後 には 塩 の 析 出 やバクテ<br />

リアの 繁 殖 を 防 ぐため,ノーマルニスキンは 水 道 水 を 流<br />

して 内 部 を 洗 浄 しているのに 対 し,クリーンニスキンは<br />

水 道 管 に 含 まれる 金 属 等 の 汚 染 を 避 けるため, 水 道 水 の<br />

洗 浄 を 行 わずに 次 回 の 採 水 時 まで 蓋 を 閉 めて 保 管 してい<br />

る.ただし, 本 観 測 航 海 では 高 頻 度 でCTD 採 水 を 実 施 し<br />

ており, 水 道 水 の 洗 浄 を 行 わないことによる 明 らかな 塩<br />

の 析 出 やバクテリアの 繁 殖 は 確 認 されていない.また,<br />

海 水 サンプルに 直 接 接 触 するペットコック,エアーベン<br />

トおよびOリングはクリーンニスキンでは 事 前 に 酸 洗 浄<br />

したものを 使 用 している(Fig. 1).Oリングはノーマルニ<br />

スキンではニトリルゴム 製 のものを 使 用 しているが,ク<br />

リーンニスキンでは 酸 洗 浄 するためより 耐 薬 品 性 の 強 い<br />

フッ 素 ゴム(バイトン) 製 のものを 使 用 している.ク<br />

リーンニスキンのOリングは 蓋 ,ペットコック,エアー<br />

ベントに 使 われている 全 てのOリングをフッ 素 ゴム(バ<br />

イトン) 製 に 交 換 している.ニスキンボトル,ペット<br />

コック,エアーベントおよびOリングの 洗 浄 方 法 は 以 下<br />

の 通 りである.<br />

・ニスキンボトル<br />

(クリーンニスキン)<br />

5%アルカリ 性 洗 剤 (エキストランMA01)で 一 日 間<br />

浸 漬 後 , 蒸 留 水 ですすぐ.1N 塩 酸 を 内 部 に 満 たし,<br />

一 日 間 置 く.ミリQ 水 でよくすすいだ 後 ,ミリQ 水<br />

を 内 部 に 満 たし, 二 日 間 置 くことを2 回 繰 り 返 して<br />

内 部 の 酸 を 完 全 に 取 り 除 く.<br />

(ノーマルニスキン)<br />

クリーンニスキンの 洗 浄 方 法 と 同 じ.ただし1N 塩 酸<br />

の 代 わりに0.1N 塩 酸 を 使 用 .<br />

・ペットコック,エアーベント(クリーンニスキンの<br />

み)<br />

5%アルカリ 性 洗 剤 (エキストランMA01)で 二 日 間<br />

浸 漬 後 ,ミリQ 水 ですすぐ.4N 塩 酸 に 一 日 間 浸 漬 後 ,<br />

ミリQ 水 ですすぐ. 濃 硝 酸 ・ 濃 硫 酸 ・ 濃 過 塩 素 酸 の<br />

1:1:1 混 液 を80℃に 加 温 して8 時 間 浸 漬 し,ミリQ 水<br />

ですすぐ.その 後 ,6N 塩 酸 を80℃に 加 温 して8 時 間<br />

浸 漬 し,ミリQ 水 ですすぐ.さらに,ミリQ 水 を80℃<br />

に 加 温 して8 時 間 浸 漬 し,ミリQ 水 ですすぐ.<br />

・Oリング(クリーンニスキンのみ)<br />

0.3N 硝 酸 を60-80℃に 加 温 して8 時 間 浸 漬 する.さ<br />

らに,ミリQ 水 を80℃に 加 温 して8 時 間 浸 漬 し,ミ<br />

リQ 水 ですすぐ.<br />

2.2. サンプリング<br />

採 水 および 実 験 は, 西 部 北 太 平 洋 で 実 施 した「みらい」<br />

MR10-06(2010 年 10 月 ~2010 年 11 月 ) お よ びMR11-02<br />

(2011 年 2 月 ~2011 年 3 月 ) 航 海 中 に3 回 行 った(Table 2).<br />

検 証 実 験 -1および 検 証 実 験 -3では, 採 水 はCTD 採 水<br />

システムを 用 いてそれぞれ10 mおよび5 m 深 度 の 水 を 採<br />

水 した. 検 証 実 験 -2では,プラスチックバケツを 用 い<br />

て 表 面 海 水 を 採 水 した. 実 際 の 現 場 観 測 を 実 施 する 際 に<br />

はニスキン 採 水 器 からの 取 水 作 業 に30 分 程 度 要 すること<br />

から, 採 水 後 ニスキンボトル 内 で30 分 放 置 した 後 ,ニス<br />

キンボトルからの 取 水 を 行 った. 採 水 地 点 の 採 水 時 の 硝<br />

酸 塩 ,クロロフィルα 量 および 培 養 実 験 中 の 表 面 の 光 合<br />

成 有 効 放 射 をTable 2に 示 す. 硝 酸 塩 はオートアナライ<br />

ザー(QuAAtro2-HR; BL TEC)を 用 いて 測 定 し(Aoyama<br />

et al., 2010), 表 面 の 光 合 成 有 効 放 射 は 紫 外 ・ 可 視 分 光 放 射<br />

計 (PUV-510B; Biospherical Instruments)を 用 いて 測 定 した.<br />

2.3. 一 次 生 産 量 測 定<br />

ニスキンボトルから, 酸 洗 浄 した 大 型 のプラスチック<br />

ボトルに 一 旦 取 水 し, 取 水 した 海 水 は 暗 所 で 酸 洗 浄 した1<br />

リットルの 透 明 なポリカーボネート 容 器 に 分 注 した 後 ,<br />

13<br />

C 標 識 された 炭 酸 水 素 ナトリウム(CLM-441; CIL)を 最<br />

Table 1. Specification of “normal” and “clean” Niskin sampler.<br />

表 1. ノーマルニスキンとクリーンニスキンの 構 成 .<br />

Normal Niskin<br />

Clean Niskin<br />

Teflon-coating × ○<br />

Acid-cleaning<br />

(Niskin bottle)<br />

Bottle-wash<br />

(tap water)<br />

0.1N HCl 1N HCl<br />

○ ×<br />

O-ring Nitrile Viton<br />

Acid-cleaning<br />

(O-ring, petcock, × ○<br />

air vent)<br />

20 JAMSTEC Rep. Res. Dev., Volume 14, March 2012, 17 _ 25


K. Matsumoto et al.,<br />

終 濃 度 0.2 mmol・L –1 になるように 添 加 した. 海 水 サンプ<br />

ルは 甲 板 上 に 設 けた 表 面 海 水 を 通 水 している 水 槽 内 で 13 C<br />

添 加 後 直 ちに 培 養 を 開 始 し, 培 養 は24 時 間 行 った. 培 養<br />

後 , 海 水 サンプルは 事 前 に 燃 焼 処 理 したGF/Fフィルター<br />

でろ 過 し, 安 定 同 位 体 比 質 量 分 析 計 (ANCA-SL; SerCon)<br />

を 用 いて 一 日 当 たりの 炭 素 取 り 込 み 量 を 求 めた(Hama et<br />

al.,1983; Matsumoto et al., 2010).<br />

2.4. クロロフィルα 測 定<br />

培 養 前 の 海 水 500 mlをGF/Fフィルターでろ 過 し,N,<br />

N-dimethylformamide 溶 液 内 で24 時 間 以 上 ,-20℃の 暗 所<br />

にてクロロフィルαを 抽 出 した.クロロフィルα 蛍 光 を<br />

蛍 光 光 度 計 (model10-AU; Turner Designs)で 測 定 し,クロ<br />

ロフィルαを 算 出 した(Welschmeyer, 1994; Matsumoto et al.,<br />

2010). 検 証 実 験 -3では, 一 次 生 産 量 測 定 と 同 様 に 酸 洗<br />

浄 したポリカーボネート 容 器 で24 時 間 培 養 後 の 海 水 サン<br />

プルに 対 してもクロロフィルα 測 定 を 実 施 した.<br />

3. 検 証 実 験 結 果<br />

3.1. 検 証 実 験 −1(ノーマルニスキン-クリーンニスキ<br />

ン 比 較 実 験 )<br />

採 水 時 にノーマルニスキンとクリーンニスキンを 使 用<br />

した 場 合 で,その 後 培 養 測 定 した 一 次 生 産 量 に 違 いが 生<br />

じるのかどうかを 調 べるため,ノーマルニスキン3 本 と<br />

クリーンニスキン3 本 からそれぞれ5サンプルずつ 取 水 し,<br />

培 養 を 行 って 一 次 生 産 量 を 測 定 した. 一 次 生 産 量 はノー<br />

マルニスキンおよびクリーンニスキンから 取 水 した 場 合<br />

で 両 者 に 有 意 な 差 が 生 じ(t-test, P


ニスキン 採 水 器 による 一 次 生 産 阻 害<br />

Inhibition of primary production by Niskin sampler<br />

Table 3. Experiment-1: Comparison of primary production between<br />

“normal” and “clean” Niskin sampler.<br />

表 3. 検 証 実 験 -1:ノーマルニスキン-クリーンニスキン 一 次<br />

生 産 量 比 較 .<br />

Sampling ID Normal Niskin Clean Niskin<br />

Primary production (mgC m -3 d -1 )<br />

1 12.5 13.9<br />

12.9 13.5<br />

13.6 14.5<br />

11.6 15.7<br />

11.6 15.3<br />

Bottle mean±S.D. 12.4±0.8 14.6±0.8<br />

2 9.5 15.8<br />

11.0 16.2<br />

11.6 16.5<br />

11.3 16.1<br />

10.4 17.0<br />

Bottle mean±S.D. 10.8±0.8 16.3±0.4<br />

3 9.6 15.3<br />

10.1 16.1<br />

10.2 17.3<br />

10.3 19.1<br />

10.8 18.2<br />

Bottle mean±S.D. 10.2±0.4 17.2±1.4<br />

Total mean±S.D. 11.1±1.2 16.0±1.4<br />

示 す.<br />

A : バケツ(コントロール)<br />

B : ノーマルニスキン( 水 道 水 洗 浄 あり)<br />

C : ノーマルニスキン( 水 道 水 洗 浄 なし)<br />

D : クリーンニスキン<br />

Aのバケツ 採 水 サンプルとDのクリーンニスキンから<br />

取 水 したサンプルには 一 次 生 産 量 に 有 意 な 差 は 見 られな<br />

かった.ノーマルニスキンの 水 道 水 洗 浄 を 行 ったサンプ<br />

ルBと 行 わなかったサンプルCの 間 には 有 意 な 差 は 見 ら<br />

れなかったが, 両 者 ともAのバケツ 採 水 サンプルの 値 よ<br />

りも 有 意 に 低 く(t-test, P


K. Matsumoto et al.,<br />

トロールとして,ノーマルニスキンの 部 品 を 一 部 クリー<br />

ンニスキン 用 のものに 交 換 して 培 養 実 験 を 行 った. 培 養<br />

後 に 一 次 生 産 量 とクロロフィルα 量 を 各 ニスキンボトル<br />

からそれぞれ3 本 測 定 した(Table 5). 以 下 にサンプル 種<br />

別 を 示 す.<br />

A : クリーンニスキン(コントロール)<br />

B : ノーマルニスキン(オリジナル)<br />

C : ノーマルニスキン(Oリングをクリーンニスキン 用<br />

に 交 換 )<br />

D : ノーマルニスキン(ペットコック・エアーベントを<br />

クリーンニスキン 用 に 交 換 )<br />

E : ノーマルニスキン(ペットコック・エアーベントお<br />

よびOリングをクリーンニスキン 用 に 交 換 )<br />

テフロンコーティングの 有 無 に 要 因 があれば,サンプ<br />

ルAのみが 高 い 値 を 示 し,B,C,D,Eのサンプルは 同<br />

様 に 低 い 値 を 示 すはずである.Oリングの 材 質 ・ 酸 洗 浄<br />

の 有 無 に 要 因 があればA,C,Eのサンプルは 高 い 値 を 示<br />

し,B,Dのサンプルは 低 い 値 を 示 すはずである.また,<br />

ペットコック・エアーベントの 酸 洗 浄 の 有 無 に 要 因 があ<br />

ればA,D,Eのサンプルは 高 い 値 を 示 し,B,Cのサン<br />

プルは 低 い 値 を 示 すはずである.<br />

一 次 生 産 量 およびクロロフィルα 量 の 測 定 結 果 を.<br />

Table 5に 示 す.Aのコントロールサンプルに 対 し,B,D<br />

のサンプルはそれぞれ37%,44%と 半 分 以 下 の 値 となり,<br />

有 意 に 低 い 値 を 示 した(t-test, P


ニスキン 採 水 器 による 一 次 生 産 阻 害<br />

Inhibition of primary production by Niskin sampler<br />

正 しく 評 価 できない.それでもなお, 今 回 の 結 果 はニス<br />

キン 本 体 からの 微 量 金 属 汚 染 , 特 に 鉄 溶 出 による 一 次 生<br />

産 量 の 増 加 よりも,むしろノーマルニスキンのOリング<br />

に 由 来 する 毒 性 による 一 次 生 産 力 の 阻 害 がニスキン 採 水<br />

器 内 部 の 問 題 としては 深 刻 であることを 示 した.<br />

クリーンニスキンの 最 大 の 特 徴 は 内 部 がテフロンコー<br />

ティングされていることであるが, 検 証 実 験 -3の 結 果<br />

から,テフロンコーティングの 有 無 ,さらにはそれに 伴<br />

うノーマルニスキンとクリーンニスキンの 酸 洗 浄 手 法 の<br />

違 いは 一 次 生 産 力 に 影 響 を 及 ぼさないことが 分 かった<br />

(Table 5).また,ペットコック・エアーベントの 酸 洗 浄<br />

の 有 無 も 一 次 生 産 への 影 響 はなく,ニトリルゴム 製 Oリ<br />

ングの 使 用 が 一 次 生 産 を 阻 害 する 要 因 であることが 今 回<br />

の 実 験 により 明 らかとなった(Table 5).これはPrice et<br />

al.(1986); Williams and Robertson(1989)が 示 したゴムに<br />

よる 海 洋 微 生 物 への 毒 性 を 改 めて 支 持 する 結 果 である.<br />

Williams and Robertson(1989)はニスキンボトル 内 のゴム<br />

チューブの 使 用 によって, 培 養 後 にクロロフィルα 量 が<br />

大 きく 減 少 し, 一 次 生 産 量 が10% 程 度 にまで 減 少 するこ<br />

とを 示 した. 我 々の 実 験 では 一 次 生 産 量 の 減 少 は50% 程<br />

度 にとどまるが,ニスキンボトル 内 部 で 使 用 しているゴ<br />

ム 製 品 はOリングのみである. 今 回 の 実 験 により,たと<br />

えサンプル 海 水 との 接 触 面 積 の 広 い 蓋 閉 用 のゴムチュー<br />

ブをニスキンボトル 内 部 で 使 用 しなくても,ニトリルゴ<br />

ム 製 Oリングの 使 用 によって 一 次 生 産 量 が 半 減 するほど<br />

の 深 刻 な 毒 性 を 示 すことが 明 らかとなった.<br />

検 証 実 験 -1では,ノーマルニスキンでの 一 次 生 産 量<br />

は 約 70%に 減 少 したが,その 他 の 検 証 実 験 の 結 果 よりも<br />

減 少 率 は 低 か っ た(Table 3).Price et al.(1986) は<br />

Thalassiosira spp.やある 種 の 羽 状 目 珪 藻 は 比 較 的 ゴムの 毒<br />

性 に 対 する 耐 性 が 強 いことを 指 摘 している. 検 証 実 験 -1<br />

の 採 水 は 北 太 平 洋 のベーリング 海 に 近 い 観 測 点 で 実 施 し<br />

たものであり,これらの 珪 藻 が 優 占 していた 可 能 性 があ<br />

る.このように, 現 場 海 域 で 優 占 している 植 物 プランク<br />

トン 種 によってゴムの 毒 性 に 対 する 影 響 は 異 なる 可 能 性<br />

がある.しかし, 検 証 実 験 -2および 検 証 実 験 -3はそれ<br />

ぞれ 北 太 平 洋 の 亜 寒 帯 循 環 域 および 亜 熱 帯 循 環 域 の 観 測<br />

点 で 採 水 されたものであるが,どちらも 約 50%かそれ 以<br />

上 の 高 い 減 少 率 を 示 している(Table 4, 5). 両 海 域 の 栄 養<br />

塩 環 境 は 大 きく 異 なるため, 植 物 プランクトン 群 集 の 種<br />

組 成 および 優 占 種 の 細 胞 サイズも 大 きく 異 なっていると<br />

考 えられる(Table 2).このことは, 多 様 な 植 物 プランク<br />

トン 種 がゴムの 毒 性 によって 一 次 生 産 量 を 減 少 させるこ<br />

とを 示 唆 するものである.<br />

検 証 実 験 -3ではニトリルゴム 製 Oリングを 使 用 した<br />

場 合 に 全 てのサンプルで 一 次 生 産 量 は50% 以 下 に 減 少 し<br />

たが, 培 養 後 のクロロフィルαの 減 少 量 は 必 ずしも 一 致<br />

しなかった(Table 5).このことは, 一 次 生 産 量 の 減 少 は<br />

植 物 プランクトンの 細 胞 死 による 細 胞 数 減 少 の 結 果 とし<br />

て 生 じるものではないことを 示 唆 している.また,ゴム<br />

の 毒 性 によって 数 日 で 植 物 プランクトンの 細 胞 死 が 生 じ<br />

ることは 報 告 されているが(Price et al., 1986), 今 回 の 実<br />

験 のように, 約 30 分 間 のゴム 接 触 の 後 に 行 った24 時 間 の<br />

培 養 期 間 中 に,どの 程 度 植 物 プランクトンの 細 胞 死 が 生<br />

じていたかは 不 明 である.クロロフィルα 量 の 減 少 は,<br />

植 物 プランクトンの 細 胞 死 だけでなく,ゴム 毒 性 による<br />

植 物 プランクトンの 増 殖 阻 害 の 結 果 , 培 養 ボトル 内 で 動<br />

物 プランクトンによる 摂 餌 が 植 物 プランクトンの 増 殖 を<br />

上 回 った 可 能 性 もある.<br />

今 回 の 実 験 から,ニスキンボトルに 取 り 付 けられるニ<br />

トリルゴム 製 Oリングは 一 次 生 産 量 を 半 減 させるほどの<br />

影 響 を 及 ぼすが, 酸 洗 浄 を 行 ったフッ 素 (バイトン)ゴ<br />

ム 製 のOリングに 交 換 することで 一 次 生 産 を 阻 害 するこ<br />

となく 測 定 できることが 明 らかとなった.さらに,ペッ<br />

トコック・エアーベントの 酸 洗 浄 の 有 無 およびニスキン<br />

ボトルのテフロンコーティングの 有 無 は 一 次 生 産 量 の 測<br />

定 に 影 響 を 及 ぼさないことが 分 かった.このことは,ニ<br />

スキン-X 採 水 器 であればノーマルニスキンでも 一 次 生<br />

産 量 測 定 のサンプリングに 使 用 できることを 示 唆 してい<br />

る. 少 なくとも,クリーンニスキンで 実 施 しているアル<br />

カリ 性 洗 剤 洗 浄 に 加 えて,0.1Nの 塩 酸 による 酸 洗 浄 を 実<br />

施 したノーマルニスキンを 使 用 すれば, 酸 洗 浄 を 行 った<br />

フッ 素 (バイトン)ゴム 製 のOリングに 交 換 することで,<br />

クリーンニスキンと 同 等 に 扱 うことができる.これまで<br />

に,シリコーンゴムも 同 様 に 一 次 生 産 への 影 響 はないこ<br />

とが 報 告 されている(Price et al., 1986).ただし,シリ<br />

コーンゴムの 場 合 は 気 体 透 過 性 が 高 いため, 微 量 ガス 成<br />

分 の 分 析 を 同 時 に 実 施 する 場 合 には 使 用 にあたって 注 意<br />

が 必 要 であろう.また,ゴムの 毒 性 による 影 響 は 植 物 プ<br />

ランクトンだけでなく 動 物 プランクトンやバクテリアに<br />

も 生 じることが 指 摘 されている(Price et al., 1986). 従 っ<br />

て, 一 次 生 産 量 測 定 だけでなく, 微 生 物 活 性 に 関 する 実<br />

験 を 行 う 場 合 には, 採 水 には 通 常 のニトリルゴム 製 Oリ<br />

ングではなく, 酸 洗 浄 を 施 したフッ 素 (バイトン)ゴム<br />

製 Oリングを 取 り 付 けたニスキンボトルを 使 用 すること<br />

が 推 奨 される.<br />

5. 結 論<br />

ノーマルニスキンを 用 いたサンプリングは 一 次 生 産 を<br />

阻 害 し, 培 養 法 による 一 次 生 産 量 の 測 定 値 を 大 きく 過 小<br />

24 JAMSTEC Rep. Res. Dev., Volume 14, March 2012, 17 _ 25


K. Matsumoto et al.,<br />

評 価 させることが 明 らかとなった.ノーマルニスキンで<br />

用 いているニトリルゴム 製 のOリングを 使 用 することが<br />

その 原 因 である. 従 来 ,ニスキン 採 水 器 に 使 われている<br />

ゴムの 一 次 生 産 への 影 響 は 指 摘 されていたものの, 今 日<br />

では 採 水 器 の 改 良 が 進 み,みらいで 使 用 しているニスキ<br />

ン-X 採 水 器 では 蓋 閉 用 のゴムチューブやスプリングを<br />

ニスキン 採 水 器 内 部 へ 通 す 必 要 がなくなっている.その<br />

ため, 現 状 ではサンプリングにおけるゴムの 影 響 はあま<br />

り 考 慮 されていない.ところが 今 回 の 実 験 は, 採 水 器 中<br />

のOリングだけでもゴムの 毒 性 により 一 次 生 産 測 定 に 深<br />

刻 な 影 響 を 及 ぼすことを 再 認 識 させることとなった. 同<br />

時 に,ニトリルゴム 製 Oリングの 代 わりにフッ 素 (バイ<br />

トン)ゴム 製 Oリングを 酸 洗 浄 して 使 用 することで, 一<br />

次 生 産 の 阻 害 を 受 けずに 培 養 できることを 明 らかにした.<br />

6. 謝 辞<br />

採 水 器 の 洗 浄 方 法 について 教 えて 頂 いた 長 崎 大 学 の 武<br />

田 重 信 教 授 に 感 謝 します. 採 水 器 の 洗 浄 ,サンプルの 分<br />

析 にご 協 力 頂 いた 株 式 会 社 マリンワークジャパンの 技 術<br />

員 , 並 びに 船 舶 の 運 航 , 観 測 作 業 に 従 事 して 頂 いた「み<br />

らい」 中 山 隆 夫 船 長 および 船 員 の 皆 様 に 感 謝 の 意 を 表 し<br />

ます.<br />

参 考 文 献<br />

Aoyama, M., J. Matsushita, and A. Takano (2010), Nutrients,<br />

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