ЛЕСНЫЕ И ПОЛЕВЫЕ МЫШИ Молекулярно-генетические ...

Молекулярная эволюция, филогения и систематика по данным полиморфизма длин...полностью она совпадает, с одной стороны в Sau3a и BglHI гидролизатах(БаиЗа-тетрануклеотид входит в BglII-сайт узнавания),а с другой — в Csp6I-H EcoRI-гидролизатах (не имеющих общихпоследовательностей узнавания). Разница в размерах получаемыхфрагментов, по нашим оценкам, находится в пределах10 пн. Таким образом, вполне вероятно, что повторяющиеся последовательностисатДНК A. argenteus маркируются кроме EcoRIрестриктазами Csp6I, Bglll и Sau3a. Позже было показано, чтоэта фракция имеет также регулярные сайты для рестриктазыDral, имеющие ту же периодичность (примерно 230 пн) (Fukushiet al., 2001).Чтобы доказать принадлежность выявляемых повторов к сателлитнойфракции, мы провели повторную обработку проанализированныхгидролизатов ДНК рестриктазами EcoRI, Sau3a,Csp6I, Alul и Mval (всего 25 вариантов). Результаты двойногогидролиза (см. рис. 5) показали следующее.1. Во всех гидролизатах высокомолекулярные фрагментыяДНК расщепляются рестриктазой Sau3a с образованием яркой240 пн полосы; ни одна другая рестриктаза подобным эффектомне обладает. Следовательно, все высокомолекулярные блокивключают в себя Sau3a-noBTop, который организован тандемнолибо в кластере с другими последовательностями.2. Использование рестриктазы Alul приводит к образованиюсерии хорошо дифференцированных фрагментов яДНК типа «лестницы»,отличающихся по молекулярной массе в разных вариантахгидролиза, т. е. нуклеазоспецифичные высокомолекулярныефрагменты обладают определенной внутренней структурой и,возможно, имеют между собой хотя бы частичную гомологию.3. Повторная обработка Csp6I-H БаиЗа-гидролизатов рестриктазойEcoRI-практически никак не влияет на количество формирующихся240 пн фрагментов, хотя EcoRI-мультимеры частичногидролизуются как Csp6I, так и Sau3a. В то же время совместныйЗаиЗа+СзрбЬгидролиз приводит к ослаблению интенсивности 240пн фрагмента (частично сохраняется лишь электрофоретическийэквивалент Csp6I-noBTopa), а также формированию нескольких«Новых» дискретных фрагментов ДНК. Таким образом, вполневероятно, что между 240 пн EcoRI-, Csp6I-H БаиЗа-повторами существуетгомология, причем последние два могут даже представлятьодни и те же участки.35